[发明专利]源于草酸青霉的4-4’异构化黑麦酮酸D在胃癌方面的应用

权利要求书

1. 一种源于草酸青霉的4-4’异构化黑麦酮酸D的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）发酵生产

生产菌的发酵培养：取草酸青霉 (Penicillium oxalicum) IBPT-6 （已于2013年12月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址：武汉 武汉大学，保藏编号是：CCTCC NO：M2013714）接种到PDA固体斜面培养基上，28℃培养箱中培养2-3天，然后接种到培养液中，28℃静止培养30天后获得菌丝体和发酵液；所述培养液组成为：每升水含甘露醇20.0 g、酵母膏3.0 g、麦芽糖20.0 g、味精10.0 g、葡萄糖10.0 g、KH₂PO₄ 0.5 g、MgSO₄·7H₂O 0.3 g、NaCl 15.0 g；

2）浸膏的获得

用纱布将菌丝体和发酵液分离；菌丝体用丙酮溶液连续超声破壁3次，过滤去除残渣，得到菌丝体的含丙酮和水的粗提物；减压浓缩去除丙酮，得到粗体物的水溶液，再以体积比1:2加入乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯粗提液，减压浓缩至近干，得菌丝体浸膏；所述丙酮溶液中含20%~30%的水；

3）化合物的分离精制

菌丝体浸膏通过100-200目硅胶拌样，以石油醚-二氯甲烷-甲醇为梯度洗脱液进行减压硅胶色谱柱层析；经过简单的薄层色谱分析，合并，分离成组分A-E；二氯甲烷洗脱的组分C再以二氯甲烷:甲醇=1:2为洗脱剂进行凝胶柱层析，经过薄层色谱分析、合并后得到四个亚组分C-1~C-4；亚组分C-3通过半制备液相色谱，以含0.1% TFA的55%乙腈为流动相洗脱，得到所述4-4’异构化黑麦酮酸D，其结构式为：。