[发明专利]LC-ICP-MS测定血浆中Pt元素含量的方法

说明书

本发明公开了一种LC‑ICP‑MS直接测定血浆中Pt元素含量的方法。本发明采用样品无稀释、液相色谱仪直接进样，电感耦合等离子体质谱法(ICP‑MS)测定血浆中Pt元素的含量。结果表明，本发明方法的线性范围在0.5～500ng/mL范围内，线性r为0.99956，方法检出限为0.16ng/mL，分别以浓度为1ng/mL、20ng/mL和400ng/mL的样品考察方法的准确性，其回收率范围为99.8～110％之间，重复性实验RSD＜1.39％不同浓度样品3天耐用性测试结果的准确度在98.0‑99.3％之间，说明本发明方法适用于生物样品采样量少且大批量分析。

技术领域

本发明涉及一种测定血浆中Pt元素含量的方法，具体涉及一种LC-ICP-MS测定血浆中Pt元素含量的方法。属于生物样品分析技术领域。

背景技术

铂植入剂作为抗肿瘤长效制剂，可在组织器官中植入给药或外科术中给药，实现局部的药物高浓度及较小的周边血药浓度。药用铂制剂主要包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂、舒铂、洛铂6种，其中顺铂和卡铂是临床使用最多的广谱抗癌药物。

抗肿瘤铂制剂在临床应用中可引起广泛的不良反应，通过监测血液铂含量以使药物长期维持在安全有效浓度范围之内，间接反映临床用药对生物组织器官的毒性反应，进而提供药动力学研究资料，做好不良反应的预防和处理，提高疗效并减轻毒副作用。

血浆样品通常样品量很少，一般只有几百微升，血浆中铂的检测需要保证进样量少、灵敏度高、结果准确。而现有的ICP-MS进样均需要蠕动泵连续进样，按照0.7～1.0mL/min的进样量计算，从样品清洗到检测结束消耗样品体积较大，血浆取样量不够一次ICP-MS分析。因此血浆中Pt的检测需要解决微量体积样品的慢速、小体积进样分析，实现稳定重复性分析和高灵敏度要求。

发明内容

本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种液相色谱-电感耦合等离子体质谱仪(LC-ICP-MS)测定血浆中Pt元素含量的方法。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种LC-ICP-MS测定血浆中Pt元素含量的方法，包括以下步骤：

(1)确定色谱-质谱工作条件；

(2)配制标准溶液，建立标准曲线；

(3)对血浆样品进行前处理；

(4)测定血浆中Pt元素的含量：血浆样品使用LC-ICP-MS检测，按照步骤(1)所述工作条件，由步骤(2)所得标准曲线得到血浆中Pt元素的浓度。

优选的，步骤(1)所述液相色谱的工作条件为不含有色谱柱。

优选的，步骤(1)所述液相色谱的工作条件为：流动相为纯水，流速为1.0mL/min；进样量为20μL进样速度为5μL/s；洗针液为纯水，洗脱程序为等度洗脱。

优选的，步骤(1)所述质谱(ICP-MS)的工作条件为：

高频功率：1.20kW；等离子体气流速：8.0L/min；辅助气流速：1.10L/min；载气流速：0.7L/min；炬管类型：Mini；雾化器类型：同轴；雾化室：旋流；雾化室温度：5℃；采样深度：5.0mm；高频频率：27.12MHz。

优选的，步骤(2)所述标准工作曲线的建立方法为：使用空白血浆配制Pt标准溶液，标准溶液浓度分别为0.0、0.5、1.5、5、15、50、150和500ng/mL，分别进行LC-ICP-MS检测，以Pt元素的浓度为横坐标，以Pt元素的峰面积为纵坐标建立标准工作曲线。

优选的，步骤(3)所述对血浆样品进行前处理的具体方法为：将适量血浆转移至离心管中，放入离心机中12000r/min离心5min，收集上层清液，使用LC-ICP-MS进行分析检测。