[发明专利]一种碱性木聚糖酶的菌株及其筛选方法、以及木聚糖酶的制备方法

说明书

本发明公开一种碱性木聚糖酶的菌株及其筛选方法、以及木聚糖酶的制备方法，所述碱性木聚糖酶的菌株为蛾微杆菌（Microbacterium imperiale）YD01，其保藏编号为CCTCC NO：M 2017762。本发明提供的碱性木聚糖酶的菌株，通过发酵培养后获得的木聚糖酶，具有最适pH为8.0、最适温度为50℃的特性，并且在pH为10.0、温度为50℃的缓冲液中保持1h后的木聚糖酶仍有41.44%的相对酶活力；在温度为80℃、pH为8.0的缓冲液中保温1h后的木聚糖酶仍有56.82%的相对酶活力，具有良好的碱耐受性及热稳定性，所述碱性木聚糖酶的菌株的最终发酵产酶水平为36.85 U/mL。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种碱性木聚糖酶的菌株及其筛选方法、以及木聚糖酶的制备方法。

背景技术

木聚糖酶(1,4 β-D xylanase, EC3.2.1.8)属水解酶类，是将木聚糖降解为低聚木糖或木糖的复合酶系。该酶在自然界的来源广泛，诸如细菌（如枯草芽孢杆菌、黄热芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、拜氏梭菌、耐盐高温双岐菌）、真菌（如木霉、青霉、米曲霉、黑曲霉、土曲霉）、放线菌、蜗牛等。木聚糖酶有重要的工业价值，已应用于食品、造纸、饲料、能源和环境众多领域，尤其是在食品制作和纸浆生物漂白中有着不可小觑的重要性。

不同来源的木聚糖酶的最适pH不一样，真菌则接近于酸性，大部分放线菌和细菌接近于中性，大大制约了木聚糖酶在工业中高温高碱性环境下的应用。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种碱性木聚糖酶的菌株及其筛选方法、以及木聚糖酶的制备方法，旨在提高木聚糖酶的耐碱性和热稳定性。

为实现上述目的，本发明提出一种碱性木聚糖酶的菌株，所述碱性木聚糖酶的菌株为蛾微杆菌（Microbacterium imperiale）YD01，其保藏编号为CCTCC NO：M 2017762。

本发明还提出一种木聚糖酶的制备方法，包括如下步骤：

将如上述的碱性木聚糖酶的菌株接入种子培养基中，于28℃、170 r/min摇床培养24 h后，加入木聚糖使木聚糖在培养基中的终浓度为0.1 g/L，诱导培养24 h，并将培养物接入产酶培养基中，于28℃、170 r/min培养48 h后，取发酵液进行分离、纯化，获得木聚糖酶。

优选地，所述种子培养基包括以下浓度的组分：葡萄糖10 g/L、蛋白胨5 g/L和氯化钠5 g/L；所述种子培养基的pH值为8.5。

优选地，所述产酶培养基包括以下组分：葡萄糖1.5 g/L、酵母粉4 g/L、硫酸镁1g/L、氯化钠0.5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L、氯化钙15 g/L，木聚糖0.01 g/L以及玉米浆15 mL；所述产酶培养基的pH值为8.0。

本发明提供的碱性木聚糖酶的菌株，通过发酵培养后获得的木聚糖酶，具有最适pH为8.0、最适温度为50℃的特性，并且在pH为10.0、温度为50℃的缓冲液中保持1 h后的木聚糖酶仍有41.44%的相对酶活力；在温度为80℃、pH为8.0的缓冲液中保温1 h后的木聚糖酶仍有56.82%的相对酶活力，具有良好的碱耐受性及热稳定性，所述碱性木聚糖酶的菌株的最终发酵产酶水平为36.85 U/mL。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实施例3中蛾微杆菌YD01在无机盐平板上的形态图；