[发明专利]一种用于修复底泥污染的高地芽孢杆菌的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种用于修复底泥污染的高地芽孢杆菌的制备方法及应用，该菌株为Bacillus altitudinis，相对于其他类型益生菌，具有营养要求简单、代谢速度快、易于扩大培养和耐热性强等优点，对底泥中总磷的修复具有良好的性能，且使用时不会产生二次污染。该菌株对不同理化性质和不同温度下的污染底泥中总磷的修复都能达到一定的效果，尤其是在温度45℃情况下，对池塘底泥中的总磷降解率可达到15.77%，在温度为35℃情况下，对湖泊底泥中的总磷修复率可达到15.62%。该菌株对底泥总磷具有良好的修复能力，可广泛应用于池塘、湖泊、河流等底泥的修复。

技术领域

本发明属于水环境保护的应用领域，具体涉及一种高地芽孢杆菌扩大培养的方法；最为重要的是涉及一种高地芽孢杆菌在修复污染底泥中的应用。本发明可广泛应用于池塘、湖泊、河流等污染底泥的修复。

背景技术

近年来，随着环境污染问题的日趋严重，越来越多的湖泊等淡水水体富营养化进程加快，其中污染底泥成为重要的内源污染来源，人们对湖泊、河流、池塘等水体内的污染底泥修复问题越来越关注。

外源污染的大量输入；大气降尘和地表径流等增加，导致水体底泥厚度增加，污染程度加剧，污染底泥已成为水体污染的重要来源。进入水体的营养物质沉降至底质表层，在一定的条件下，沉积物中的污染物不断向水体释放，成为水体富营养化的主导因子。即使在外源污染得到有效控制的情况下，湖泊仍会长期处于富营养化状态，可见，作为以底泥为代表的内源污染治理十分重要。在底泥治理方面，先后发展了清淤、遮盖、原位钝化、植物修复等多种手段，取得了一定的效果，其中底泥的生物修复技术已被国内外许多学者认定是未来底泥污染修复的主要方向。

微生物修复是目前研究较多的一种生物修复技术，是在有氧或无氧条件下将氮磷等污染物分解的一种方式，其在水环境修复中具有重要作用，具有较好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种高地芽孢杆菌的扩大培养方法，该培养方法步骤简单，操作方便。

本发明的再一个目的在于提供了一种高地芽孢杆菌在修复污染底泥中的应用，该高地芽孢杆菌对不同理化性质和不同温度下的污染底泥中总磷的修复都能达到一定的效果，且使用时不会产生二次污染，可实现底泥修复和经济环保的双赢，尤其是在在温度45℃情况下，对池塘底泥中的总磷降解率可达到15.77%，在温度为35℃情况下，对湖泊底泥中的总磷修复率可达到15.62%。

为实现上述目的，本发明采用如下技术措施：

一种高地芽孢杆菌（Bacillus altitudinis）的扩大培养方法，其步骤是：

1）培养基的配置：

液体培养基的配制方法：分别称取牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化钠5g，加去离子水至1000mL。

固体培养基的配制方法：分别称取牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂粉15g，加去离子水至1000mL。

2）菌种扩大培养：中国微生物菌种中心购买的高地芽孢杆菌菌种，放置于经高压灭菌锅121℃20分钟后冷却至室温的内有3ml培养液的10ml试管，然后将装有菌种的试管置于37℃恒温箱培养，24小时后，将试管中的菌液用无菌1ml移液枪再接种于液体培养基100ml的无菌三角瓶中，依次进行扩大培养。通过平板菌落计数法配制不同梯度的细菌浓度。

结果发现，该菌株具有易培养，繁殖快，易保存，对环境的适应性强，活性稳定等特点。

一种高地芽孢杆菌在污染底泥修复中的应用，其步骤是：

1）底泥样品选自具有3年养殖龄的养殖池塘，采集池塘底泥表层4－6 cm厚度的底泥，将底泥带回实验室，充分混匀。