[发明专利]喙尾琵琶甲的活性防御液及其获取方法和应用

说明书

本发明提供了一种喙尾琵琶甲的活性防御液的获取方法，首先提供成虫喙尾琵琶甲活体；采用物理刺激所述成虫喙尾琵琶甲活体释放防御液；将所得防御液静置2～5min，所述防御液分为防御液上层和防御液下层，将上下层分离，得到的防御液下层为活性防御液。采用本发明提供的方法能够成功获取抑制肿瘤细胞增殖的活性防御液，且取样后喙尾琵琶甲依然存活，可继续饲养，1周后可以再次取样。实施例的实验结果表明，所述活性防御液能够抑制肿瘤细胞增殖，具有显著的细胞毒活性，能够进一步开发成为抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及昆虫防御液获取技术领域，尤其涉及喙尾琵琶甲的活性防御液及其获取方法和应用。

背景技术

喙尾琵琶甲(Blaps rynchopetera Fairmaire)属鞘翅目(Coleoptera)拟步甲科(Tenebrionidae)琵琶甲属(Blaps)，俗名臭壳子，也叫臭屁虫、打屁虫，是云南彝族长期广泛使用的昆虫药物，具有清热解毒、活血化瘀、祛风定痛、软坚散结之功效，用于热证发烧、饮食积滞、小儿疳积、夜惊、乳癖、乳痰、积聚、风湿痹痛、牙龈肿痛、疮痒肿毒、湿疹、皮肤瘙痒等。在云南民间还常将喙尾琵琶甲应用于治疗咳嗽、胃炎、疔疮、肿瘤等疑难杂症。云南省滇中和滇西地区有多例采用臭壳子治愈多种癌症的病例报告，并有疗效确切地用于治疗肝癌、胃癌、直肠癌、膀胱癌、子宫颈癌、乳腺癌、食道癌等肿瘤之验方临床记录。据调查，彝族民间医生在治疗肿瘤、心血管及类风湿等疑难病症的处方中，80％以上都含有该昆虫药。

现有技术中是通过剥离虫体分泌腺的方法收集喙尾琵琶甲防御液，但此法仅适用于获取少量防御液，且仅能取样一次。另一种方法则是用化学试剂(如乙醇或甲醇)刺激喙尾琵琶甲活体，使其分泌防御液于化学试剂中，去除所述化学试剂即得到防御性分泌物；然而，此法在去除化学试剂的过程中，会使防御液中部分挥发性大的组分流失，影响防御液的细胞毒活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种喙尾琵琶甲的活性防御液及其获取方法和应用，采用本发明提供的方法能够成功获取抑制肿瘤细胞增殖的活性防御液，且取样后喙尾琵琶甲依然存活，可继续饲养，1周后可以再次取样。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种喙尾琵琶甲的活性防御液的获取方法，包括以下步骤：

(1)提供成虫喙尾琵琶甲活体；

(2)采用物理刺激所述步骤(1)中的成虫喙尾琵琶甲活体释放防御液；

(3)将所述步骤(2)中所得防御液静置2～5min，所述防御液分为防御液上层和防御液下层，将上下层分离，得到的防御液下层为活性防御液。

优选的，在进行所述步骤(2)中物理刺激前，将所述成虫喙尾琵琶甲活体饲养1～2天，喂食切蔬菜碎和/或水果碎，饲养环境温度为18～25℃，湿度为40％～80％。

优选的，所述步骤(2)中物理刺激是从背部抓取成虫喙尾琵琶甲活体，拇指和食指固定所述成虫喙尾琵琶甲活体的腹背部，将所述成虫喙尾琵琶甲活体的尾部碰触收集容器的内壁。

优选的，所述步骤(3)中静置的时间为3min。

优选的，所述步骤(3)中分离采用毛细滴管、注射器或分液漏斗进行。

本发明提供了上述技术方案所述获取方法得到的喙尾琵琶甲的活性防御液，包括2-甲基对苯醌和2-乙基对苯醌，所述活性防御液中2-甲基对苯醌和2-乙基对苯醌的总质量的百分含量≥50wt％。

优选的，所述活性防御液中2-甲基对苯醌和2-乙基对苯醌的总质量的百分含量为52～85wt％。

本发明提供了上述技术方案所述活性防御液在制备抗肿瘤药物中的应用。

优选的，所述抗肿瘤药物为抗消化道肿瘤药物。