[发明专利]一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转生理雌性鱼育筛方法

说明书

本发明公开了一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转为生理雌性鱼育筛方法，包括鱼苗孵化、试验鱼苗选择、卤虫孵化、雌二醇溶液浸泡卤虫、卤虫作为激素载体饲喂鱼苗、鱼种和成鱼的生理性别观察、遗传性别鉴定步骤。通过优化的程序筛选合适的饲喂起始时间、浸泡卤虫的雌二醇浓度和时间、饲喂的持续处理时间，将遗传雄性个体性逆转为生理雌性个体，使用雄性特异的分子标记鉴定遗传雄性生理雌性个体，将其分塘饲养，按照雄鱼性逆转→人工雌核发育→超雄鱼→全雄鱼的育种技术路线，本发明为乌苏里拟鲿全雄鱼育种在短期内提供大量高质的基础性材料。

技术领域

本发明涉及鱼类生物技术育种领域，具体涉及一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转为生理雌性鱼育筛方法。

背景技术

在鱼类养殖生产实践中，人们发现有多种鱼类在雌雄个体间存在形态、生长速度、性成熟体重等方面的雌雄二型性现象，若进行单行养殖不仅可以获得规格整齐的商品鱼，提高饲料的利用率，增加养殖户的收入，而且可以推进现代渔业产业化和形成具有自主知识产权的新品种，具有独特的优势与应用。因此，进行鱼类性别控制育种和单性养殖是水产业发展的一个重要方向。

鱼类性别控制育种最常用的做法是用性激素诱导遗传性别逆转的亲鱼，与遗传性别相同的另一性别的鱼交配以获得超雄或超雌鱼，用超雄或超雌鱼与正常的雌鱼或雄鱼交配即可获得全雄或全雌鱼苗，达到单性养殖的目的。这是因为鱼类性腺性别不仅受遗传因子控制，还容易受到内外环境影响，特别是外源性激素的作用，在个体发育早期使用激素处理可以使得鱼苗的遗传性别与生理性别不一致，产生性别逆转现象。乌苏里拟鲿就具有典型的体型、生长性别二型性现象。在相同的生长周期内，雄鱼生长速度快于雌鱼，成鱼雄性体重可达雌性二倍甚至更多。若能进行全雄单性养殖，将会大幅提升产量，提高饲料的转化系数，降低养殖成本，大幅提高其养殖的社会和经济效益。按照雄鱼性逆转→人工雌核发育→超雄鱼→全雄鱼的技术路线，获得遗传雄性而生理雌性鱼是育种成功的关键一环。但不同的鱼类其遗传物质组成不同、性别决定机制不同、性腺发育时序与进程不同，在一种鱼类激素诱导性逆转成功的方法与步骤不能直接应用于另一种鱼类，必须进行重新开发。

目前性激素诱导鱼苗性逆转主要有以下三种方法：（1）激素溶液直接浸泡。将鱼苗直接在一定浓度的激素溶液中浸泡一段时间后取出，持续到性腺发育形成。浸泡法对于乌苏里拟鲿这种无鳞鱼来说存在相当大的风险，处理时间长、对鱼苗刺激大、幼鱼体质差、对鱼苗造成损害影响其存活。（2）饲料拌喂。将激素直接拌入商品鱼饲料中，投喂给鱼苗食用。乌苏里拟鲿属于杂食性，早期以浮游生物为饵料，商品饲料适口性差、繁殖季节水温高易使水体浑浊、生长杂菌影响鱼苗健康、激素污染水体，鱼苗存活率低。（3）活饵料浸泡饲喂。卤虫无节幼体是鱼虾幼苗的优质饵料，营养丰富且全面，是乌苏里拟鲿仔鱼的优秀适口饵料。在激素浸泡过程中，通过呼吸和吞咽使激素进入虫体内，过滤清洗后虫体体表激素残留量极少、不会污染水体，鱼苗受刺激小、存活率高。但因为鱼苗个体娇嫩，什么时间开始处理，处理时激素的浓度如何选择，处理的持续时间多长效果最好，稍一不慎就将引起鱼苗的大量死亡，使得育种工作失败。

再有性激素诱导鱼苗性逆转是否成功，需要测交进行确定性验证，一般需要耗费4-5年时间，难以在短期内获得大量育种材料。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转为生理雌性鱼育筛方法，性逆转率达95%以上，6个月存活率达60%左右，激素诱导性逆转结合雄性特异的分子标记鉴定遗传性别，可在试验当年短期内获得大量育种材料。

本发明通过以下技术方案实现：

一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转生理雌性鱼育筛方法，包括以下步骤：

（1）亲鱼催产；

（2）鱼苗孵化；

（3）性激素诱导鱼苗性逆转