[发明专利]一类香豆素腙化合物、其制备方法及应用

说明书

本发明涉及一类选自下列化合物的香豆素腙化合物、其制备方法和应用。本发明的香豆素腙化合物或其盐本身只有微弱的荧光，但可与甲醛特异性快速反应，生成具有强荧光的产物，且荧光强度与甲醛浓度间存在线性相关，从而实现对甲醛的特异性检测和定量分析。本发明的香豆素腙化合物或其盐适用于环境中甲醛含量测定，细胞及组织中甲醛的标记成像，生物样本如组织匀浆液、血浆、尿液、唾液等样本中甲醛含量测定，以及食品、化妆品、衣物等生活样品中甲醛含量的测定。

技术领域

本发明属环境分析化学及生物检测领域，涉及一类香豆素腙化合物、其制备方法、作为检测甲醛的荧光探针分子的应用、在检测环境中及生物样本中甲醛含量中的应用。

背景技术

甲醛是一种无色气体，有特殊的刺激气味，对人眼、鼻等有刺激作用。环境中高浓度的甲醛对人体有致敏、致畸和致癌等毒性，甲醛因而在2006年被确定为1类致癌物。因此，检测环境中，尤其是家具、新装修空间、新衣物材料、甚至食品中的甲醛含量是一项重要且有实际意义的工作。

环境中高浓度甲醛的毒性作用在国内外已被深入研究。然而与之相反的是，近年来人们发现人体几乎所有细胞中均存在内源性甲醛！以大脑组织为例，研究发现，大脑组织中的生理内源性甲醛处于较高水平，其中皮层组织中甲醛浓度为0.2mmol/L左右，海马组织为0.4mmol/L左右，提示其可能参与到大脑正常的生理活动中；而大脑细胞中内源性甲醛的异常聚集可在醛酮应激、氧化应激等各种诱导因素的作用下，造成神经细胞功能障碍、变性死亡，导致学习、记忆功能障碍。目前，由于缺乏甲醛在生物原位环境中准确、简便定量分析的检测方法，甲醛的生理性和病理性作用研究受到极大限制。如何简便易行地检测和评估内源性甲醛的浓度水平和组织分布特征，对于预测和评估相关疾病的进展和程度，有着重要的临床意义。然而，常规的检测方法如分光光度法、色谱分析法等在医学和生命科学领域的应用存在诸多限制，如检测灵敏度较差，难以实现活细胞或活体组织中甲醛的实时在线检测等，这使得甲醛在活体生物样本中的生理及病理作用研究受到限制。因此，开发适用于复杂活体生物样本的灵敏度高、选择性好的甲醛快速分析检测方法对研究内源性甲醛的生理病理作用具有重要的意义。

小分子荧光探针是检测细胞内分子事件的高效工具之一。小分子荧光探针检测法具有灵敏度高，选择性好等优点，兼之小分子探针通常具有良好的生物膜通透性，且可通过调整结构优化其在生物体内的吸收代谢性质，因此更适用于活细胞/活组织中微量代谢分子的检测。目前仅有少量用于甲醛检测的荧光探针被报导，而多数存在着检测反应慢、灵敏性差的问题，且在检测甲醛的同时会消耗部分甲醛，从而扰动生物样本中内源性甲醛的浓度。因此，发展高灵敏性、且不会扰动内源性甲醛浓度的新型荧光探针，是目前探针研究领域的前沿和热点。

发明内容

本发明的一个方面，提供了一类选自下列化合物的香豆素腙化合物或其盐：

其中：

R₁各自独立地选自氢、卤素、氰基、-C(＝O)R₄、取代或未取代的C₁-C₄烷基、取代或未取代的C₁-C₄烷氧基、取代或未取代的C₆-C₁₀芳基，和取代或未取代的5-10员芳香杂环基；

R₂各自独立地选自氢和甲基；

R₃为N(R₅)₂或取代或未取代的5-10员杂环基，优选为N(R₅)₂、

R₄为羟基、取代或未取代的C₁-C₄烷氧基或-N(R₅)₂；