[发明专利]一种同时测定冠心宁片中丹酚酸B和阿魏酸含量的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定冠心宁片中丹酚酸B和阿魏酸含量的方法，具体为：将冠心宁片预处理制成待测样品，将待测样品注入高效液相色谱仪，在同一色谱条件下采用流动相梯度洗脱，同时测定丹酚酸B和阿魏酸的含量。本发明的含量测定方法学验证完全符合规定，是一种先进的质量控制方法。

(一)技术领域

本发明涉及一种中药复方制剂的含量测定方法，具体涉及一种测定冠心宁片中丹酚酸B和阿魏酸含量的方法。

(二)背景技术

冠心宁片为正大青春宝药业有限公司研发的中药新产品，于2015年4月获得国家食品药品监督管理总局颁发的生产批件。它是丹参和川芎两味中药组成的复方制剂，系部颁中药17册收载的“冠心宁注射液”经改变给药途径研制而成的中药制剂。冠心宁片具有活血化瘀、通脉养心的功效，用于冠心病稳定型劳累性心绞痛Ⅰ、Ⅱ级中医辩证属心血瘀阻证，症见胸痛、唇舌紫暗。

丹参中的丹酚酸B和川芎中的阿魏酸，均是目前公认的在心血管方面具有较强药理活性的成分，因此将这两个成分作为冠心宁片的含量测定成分，用于控制冠心宁片产品的质量和提供可控的、稳定的生产工艺。

一般中药复方制剂对于检测不同药味中的不同成分，采用不同的色谱条件进行检测。本发明采用同一色谱条件同时测定冠心宁片中的丹酚酸B和阿魏酸含量，能够简化供试品制备步骤、提高检测效率、降低检测成本、减少溶剂使用有利于环境保护。

(三)发明内容

本发明采用高效液相色谱法，在同一色谱条件下，采用流动相梯度洗脱，使用DAD紫外检测器，在不同波长处同时测定冠心宁片中丹酚酸B和阿魏酸含量。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种测定冠心宁片中丹酚酸B和阿魏酸含量的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)待测样品制备：将冠心宁片研细混匀后加入体积浓度25～75％甲醇水溶液或体积浓度25～75％乙醇水溶液，制成混合液，将混合液在超声频率25～40KHz、超声功率80～200W的条件下超声处理10～30分钟，冷却后取超声处理后的混合液离心，取上清液，获得待测样品；

(2)含量测定：将步骤(1)制备的待测样品注入高效液相色谱仪进行检测，获得待测样品的高效液相色谱图；以待测样品高效液相色谱图中丹酚酸B峰面积和阿魏酸峰面积，根据丹酚酸B标准曲线和阿魏酸标准曲线，获得待测样品中丹酚酸B和阿魏酸含量，相应换算得到冠心宁片中丹酚酸B和阿魏酸的含量；所述丹酚酸B标准曲线和阿魏酸标准曲线是将丹酚酸B对照品和阿魏酸对照品用体积浓度25～75％甲醇水溶液或体积浓度25～75％乙醇水溶液配制成混合对照品溶液，取不同体积的混合对照品溶液注入高效液相色谱仪，在待测样品相同的色谱条件下进行检测，获得混合对照品溶液的高效液相色谱图，以混合对照品溶液的高效液相色谱图中丹酚酸B的色谱峰的峰面积为横坐标，以混合对照品溶液中丹酚酸B的进样量为纵坐标制作丹酚酸B标准曲线，按同样方法制作阿魏酸标准曲线；高效液相色谱仪测试条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以体积浓度0.1～0.5％磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱条件为0～15min时流动相A的体积分数为15～20％，15～20min时流动相A的体积分数为20～23％，20～30min时流动相A的体积分数为23～24％，30～31min时流动相A的体积分数为24～100％，31～36min时流动相A的体积分数为100％，36～37min时流动相A的体积分数为100～15％，37～43min时流动相A的体积分数为15％，DAD紫外检测器，同时在285nm处检测丹酚酸B色谱峰、323nm处检测阿魏酸色谱峰。

进一步，所述步骤(1)中，所述加入甲醇水溶液或乙醇水溶液体积用量以研细混匀后冠心宁片质量计为250～1000ml/g(优选500ml/g)。

进一步，所述步骤(1)中，所述甲醇水溶液优选为体积浓度50％甲醇水溶液，所述乙醇水溶液优选为体积浓度50％乙醇水溶液。