[发明专利]一种人的NK/T细胞系

说明书

本发明涉及细胞系，具体公开了一种人的NK/T细胞系，保藏编号为CGMCC No.14892。本发明所提供的人NK/T细胞系可长期传代，大量扩增，并具有较强的抗肿瘤活性，为研究者深入开展慢性活动性EBV感染疾病机理研究、筛选慢性活动性EBV感染、EBV相关淋巴细胞增殖症等诊断分子标记物、治疗预后标记物及治疗药物、CD8+T细胞、自然杀伤细胞抗肿瘤作用机制及临床过继免疫治疗提供新的实验模型。

技术领域

本发明涉及细胞系，具体地说，涉及一种人的NK/T细胞系。

背景技术

T细胞可以根据是否表达CD4或CD8受体分子而划分为两个亚群。CD8+T细胞通过直接杀伤作用，主要负责对靶细胞的清除，如被病毒感染的细胞和表达有肿瘤特异性抗原的细胞。自然杀伤细胞(NK细胞)是机体重要的免疫细胞，具有抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节作用。

NK细胞和T细胞一直被认为是杀死癌细胞和治疗感染的绝佳武器。过继免疫治疗通常需要从癌症病人体内收集T细胞，在实验室给它们武装上肿瘤特异性受体，并将之回输进入病人体内。然而，过继免疫治疗很耗时，同时癌症病人可能没有足够的T细胞或者NK细胞可用。同时NK细胞和T细胞纯化和体外大量扩增技术上存在一定难度。因此科学家试图建立细胞系，用同种异体NK细胞进行肿瘤生物治疗，国外科学家相继建立了HANK、KHYG-1、NK-92、NKL、PLT、MOTN、IMC-1、NK-YS、KAI3、SNK-1、SNK6以及YT、NK3.3等，还有通过稳定转染IL-2获得的NK-92MI、IL-2/NKL、IL-2/NK3.3等转基因NK/T细胞系。尤其是NK-92的建立，促进了其在肿瘤过继免疫治疗中的应用，并为深入开展研究NK和或T细胞的特征、功能、进一步揭示它在免疫系统中的确切作用，提供了有力的研究材料。

现有技术中，公开了众多由来自鼻腔T/NK细胞淋巴瘤患者(Nagata H,Konno A,Kimura N,Zhang Y,Kimura M,Demachi A,Sekine T,Yamamoto K,Shimizu N.Blood 2001,97:708–713)以及CAEBV患者的外周血单个核细胞所建立的NK/T细胞系或T细胞系(HiroshiNagata,1Tsutomu Numata,1Akiyoshi Konno,Pathology International 2001；51:778–785)。这些细胞系是用超过10mL的外周血，经过流式细胞分选后利用高浓度的细胞因子培养获得的纯化的细胞系。这类细胞系依赖高浓度的细胞因子，事先经过纯化，研究表明这类细胞不能完全代表CAEBV的发病模型(Ken-Ichi Imadome1,Misako Yajima1,Ayako Arai，et al.Plos Pathogen,2011,V7(10),e1002326)。因此，提供一种来源CAEBV患者的未经纯化的，包含患者自身感染NK和或T的细胞系，对于研究该类疾病和筛选诊断分子marker以及筛选药物具有重要意义和独特价值。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一株可长期在体外传代培养，大量扩增的能作为研究模型的人NK/T细胞系。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

一种人NK/T细胞系，经鉴定为人NK/T细胞系L311，分类命名为：人的细胞系，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)，保藏日期为2017年12月4日，保藏编号为CGMCC No.14892。

本发明所提供的人NK/T细胞系可长期传代，大量扩增，为研究者深入开展慢性活动性EBV感染疾病机理研究、筛选慢性活动性EBV感染、EBV相关淋巴细胞增殖症等治疗药物、CD8+T细胞、自然杀伤细胞抗肿瘤作用机制及临床过继免疫治疗提供新的实验模型。

本发明所述的人NK/T细胞系L311，是一株源自慢性活动性EBV感染淋巴细胞增殖症病人的细胞系。