[发明专利]一种利用多糖基介质对羟基红花黄色素A富集纯化的方法

说明书

本发明涉及中药提取物的技术领域，尤其涉及一类中药中含有的羟基红花黄色素A的富集纯化方法。利用多糖基介质对于中药中有效成分高效的分离富集纯化的性能，本发明提供了一种利用多糖基介质对羟基红花黄色素A富集纯化的方法，可有效的对该类药用活性成分进行精制，并可同时实现有效的富集。对提供高品质、高纯度、高提取率的，标准统一、稳定的羟基红花黄色素A有着重要的应用意义和经济价值，同时对促进中药产业的标准化、规范化，有着极其重要的作用。

技术领域

本发明涉及中药提取物的技术领域，尤其涉及到一种对羟基红花黄色素A富集纯化的方法，主要为溶剂调控下多糖基介质对于特定分子结构生物碱类分子的吸附与解吸附过程，并涉及到对于新型多糖基介质结构的设计与应用。

背景技术

羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)是一种查尔酮苷类化合物，红花中水溶性红色素的主要组成成分。红花是菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花，早在近2000年前的东汉时期，张仲景在《金匮要略》中就记载了红花的药用价值。据2010版《中华人民共和国药典》记载，其具有活血通经，散瘀止痛的功效。而近年来的研究表明，红花中的羟基红花黄色素A是红花中的一种重要的药理活性成分，已被发现具有抗血小板聚集、抑制血栓形成、减轻心脑缺血损伤、抗氧化活性、抗肿瘤活性等作用，并在分子层面、细胞层面，给出了较为详尽的解释。因此作为一类具有良好药理活性的化合物，其有效的分离提取和富集纯化过程就显得十分重要。

一般的，羟基红花黄色素A的分离提取与富集纯化过程，目前在工艺方面有着较为详细、系统的研究。在提取过程中，往往以水或水/醇的混合物作为提取介质。后期富集纯化的过程一般使用大孔树脂作为层析介质进行层析处理，进一步的纯化工作可有一些应用葡聚糖介质作为层析介质的例子。但大孔树脂作为一种聚合物基介质，对于红花的提取物具有较强的非特异性吸附，羟基红花黄色素A也会在介质上有较强的吸附，直接影响的最终的回收率。而葡聚糖的层析介质采用最多的商品化介质Sephadex LH-20，这类介质应用范围大，但作为一种葡聚糖基，并经过化学修饰的层析介质，其在多糖基的基础上，进一步的修饰使得介质的疏水性增强，由于羟基红花黄色素A具有十分强的亲水性，因此在这类疏水性的多糖介质中有效的吸附能力明显下降，也就在很大程度上限制了这类多糖介质在羟基红花黄色素A富集分离中的应用。

多糖基介质常常被用于凝胶层析工艺之中，其具有较为稳定的结构，可以在较宽的pH范围内得到使用，同时具有较为优良的机械性能，可适用于多次使用过程而不改变其本身的层析性质。1959年，第一种多糖基介质，交联葡聚糖被制备了出来，由此以后，琼脂糖、纤维素等多种多糖基质，被逐渐合成、制备出来，并作为介质应用于层析工艺之中。以琼脂糖为例，其在凝胶状态下，多糖分子链结构之间会形成较为稳定的多糖基骨架，经进一步的化学交联之后会形成较为稳定的含孔介质材料。这类结构骨架的亲水性和对于生物大分子良好的相容性，使得这类介质对蛋白质等生物大分子有着很好的纯化效果。同时，对于中药或其它天然植物的提取物，其含有大量的蛋白质、多糖和其它一些性质差异很大的化合物分子，在纯化过程往往需要具有有效富集、纯化能力的介质材料。所以，在中药或其它天然植物的提取物分离富集纯化领域，多糖基介质的应用具有良好的应用意义和现实情境。

因此，利用具有较强亲水性的多糖基介质的设计与应用，对于有效的富集纯化羟基红花黄色素A这类具有很好水溶性的化合物分子，将很可能有效的提高这类药用分子在富集纯化过程中的总提取效率。为提供高品质、高纯度、高提取率的，标准统一、稳定的羟基红花黄色素A有着重要的应用意义和经济价值，促进中药产业的标准化、规范化，有着极其重要的作用。

发明内容

本发明针对前述问题，提出了有效富集纯化羟基红花黄色素A的方法，并通过在溶剂调控下多糖基介质对于特定分子结构生物碱类分子的吸附与解吸附过程的控制，利用特定结构的多糖基介质实现了这一富集纯化过程。