[发明专利]重组GLP-1类似物Fc融合蛋白的优化基因及其应用有效
申请号: | 201711390118.X | 申请日: | 2017-12-21 |
公开(公告)号: | CN108103088B | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
发明(设计)人: | 肖海鹏;陈英;张奕敏;张玮;龚庆伟;张晓焰;马利;陈小锋;李文佳 | 申请(专利权)人: | 广东东阳光药业有限公司 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C07K19/00;C12N15/85;C12N5/10 |
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地址: | 523808 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 glp 类似物 fc 融合 蛋白 优化 基因 及其 应用 | ||
1.一种重组融合蛋白基因,其特征在于,所述重组融合蛋白基因具有A-B结构的基因序列,其中A为信号肽基因,B为编码GLP-1类似物Fc融合蛋白的基因;所述融合蛋白基因中,信号肽A的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示,所述编码GLP-1类似物Fc融合蛋白的基因B的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的重组融合蛋白基因,其特征在于,所述重组融合蛋白基因的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。
3.含有权利要求1所述重组融合蛋白基因的重组表达载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体为pXC17.4。
5.含有权利要求3或4所述重组表达载体的宿主细胞。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为CHOK1SV GS-KO细胞。
7.权利要求1所述重组融合蛋白基因在生产GLP-1类似物Fc融合蛋白中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,包括:将具有权利要求1所述的信号肽基因和所述的编码GLP-1类似物Fc融合蛋白的基因重组,得到优化后的重组融合蛋白基因;将上述重组融合蛋白基因插入表达载体中,得到重组表达载体;将上述重组表达载体进行PvuI线性化,转化宿主细胞,筛选获得阳性宿主菌株;培养阳性宿主菌株,诱导GLP-1类似物Fc融合蛋白的表达,回收并纯化所表达的GLP-1类似物Fc融合蛋白。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述重组表达载体为pXC17.4;所述宿主细胞为CHOK1SV GS-KO细胞。
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