[发明专利]一种测定甲状腺球蛋白含量的试剂盒及其测试方法

说明书

本发明公开了一种采用磁微粒化学发光法测定人血清中甲状腺球蛋白(Tg)含量的试剂盒。试剂盒包括校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂、发光底物；其中抗试剂异硫氰酸荧光素标记的甲状腺球蛋白包被抗体和碱性磷酸酶标记的甲状腺球蛋白标记抗体；磁微粒试剂为磁微粒与羊抗FITC连接物。本发明将化学发光技术与免疫磁微粒相结合，提供了一种接近均相的反应体系，并且采用了一步法反应模式，使得检测灵敏度、精密性大大提高、检测范围扩大，反应时间大大缩短，从开始加样到检测结果，时间少于35min,明显快于同类试剂盒；并且可以在全自动化学发光仪上同时测定多个样本，实现甲状腺球蛋白的高通量快速化测定，准确度高，特异性强，精确度和检测效率有了较大的提高。

技术领域

本发明涉及生物化学技术领域，具体涉及一种采用磁微粒化学发光法测定人体中甲状腺球蛋白(Tg)含量的试剂盒。

背景技术

甲状腺球蛋白(Thyroglobulin，Tg)，是甲状腺滤泡上皮分泌的660ku糖蛋白，每个Tg约有2个甲状腺素(T4)和0.5个三碘甲腺原氨酸(T3)分子，储存在滤泡腔中。溶酶体水解Tg表面T4、T3并使之释放入血，同时少量的Tg也释放入血，部分Tg经甲状腺淋巴管分泌入血。血循环中的Tg被肝脏的巨噬细胞清除。人的此种蛋白质由2767个氨基酸残基组成，是体内碘在甲状腺腺体的贮存形式，经水解可生成甲状腺素和3，5，3′-三碘甲腺原氨酸。

血清TG的改变较多见于甲状腺部位的恶性肿瘤，如TG在甲状腺滤泡状癌、甲状腺乳头状癌和间变癌都可出现不同程度的升高；而甲状腺髓样癌血TG可正常或降低。前者主要是因为甲状腺的破坏以及肿瘤组织分泌一定量的TG，而致血中TG升高；后者的肿瘤组织来源于甲状腺C细胞，而非甲状腺上皮细胞，故其血清TG并不升高。甲状腺功能亢进症、甲状腺瘤、亚急性甲状腺炎以及慢性淋巴细胞性甲状腺炎等甲状腺疾病都可出现血中TG水平升高。需要检测的人群：心悸、胃纳明显亢进，但体重下降，疲乏无力，怕冷、皮肤干燥少汗、粗糙、泛黄、发凉等人。相关疾病包括：产后甲状腺炎，放射性甲状腺炎，结节性甲状腺肿，亚临床甲状腺功能亢进，甲亢合并妊娠，甲状腺炎，急性化脓性甲状腺炎，慢性自身免疫性甲状腺炎，小儿无甲状腺性克汀病，小儿慢性淋巴细胞性甲状腺炎等。

目前已知的甲状腺球蛋白测定方法有放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、胶乳增强比浊法等。放射免疫法步骤繁琐，试剂价格昂贵，需使用配套的仪器且存在放射性污染。酶联免疫吸附法存在检测时间长、操作复杂、重复性差、不适于急诊和临床病人及时诊断的需要。胶乳增强免疫比浊法操作简单、快速，但是灵敏度低、低值重复性差。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种准确度高的采用磁微粒化学发光法测定人血清中甲状腺球蛋白(Tg)含量的试剂盒。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种测定甲状腺球蛋白含量的试剂盒，包括校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂、发光底物；

所述磁微粒试剂是将抗异硫氰酸荧光素抗体与羧基磁珠偶联制成，所述发光底物是将ALPS溶解于发光底物缓冲液中制成；

分别配制校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂、发光底物；将校准品、质控品、抗试剂、磁微粒试剂、发光底物，独立地置于包装容器内，得到甲状腺球蛋白的定量测定试剂盒；

(一)、所述校准品、质控品的配制，包括以下步骤：

用校准品缓冲溶液溶解甲状腺球蛋白抗原，配制抗试剂的校准品和质控品；其中，所述校准品缓冲溶液是通过在1L的新生牛血清中加入0.01g～0.05g的四环素和0.1g～0.5g的硫酸新霉素，完全溶解后经过0.22μm滤膜处理制备而成；

(二)、所述抗试剂的配制：

1)抗试剂缓冲液的制备：