[发明专利]一种蛋白质PAGE凝胶电泳快速染色试剂盒及染色方法

权利要求书

1.一种蛋白质PAGE凝胶电泳快速染色方法，其特征在于，其包括以下步骤：

步骤S10制作染料一，按体积比20-30:2-6分别量取无水乙醇和磷酸混合均匀，使用去离子水定容至无水乙醇终浓度为40-60％，保存于棕色瓶中备用；

步骤S20制作染料二，按质量比，硫酸铝：硫酸铵＝0.5-1.5：1-4称取硫酸铝和硫酸铵，混合；以硫酸铝和硫酸铵混合物为基础，按1-2g/ml的比例量取磷酸，按1-2g/ml的比例量取超纯水，将磷酸和超纯水加入到硫酸铝和硫酸铵混合物中，加热搅拌1.5h至完全溶解；再按4-8mg/ml加入考马斯亮蓝G-250和按体积比，混合物：超纯水＝0.5-1.5:1-4加入超纯水，常温搅拌30min；搅拌结束后按体积比，混合物：甲醇＝2-4：0.5-2加入甲醇，密封搅拌10min，再按体积比超纯水: 混合物=3-5:4-6加入超纯水对混合物定容并保存于棕色瓶中备用；

步骤S30显色反应：从电泳池取出凝胶，浸入超纯水中，轻摇清洗，将水倒干，再将凝胶浸入步骤S10制成的染料一中，轻摇20-40min，倒出染料一，再将凝胶浸入步骤S20制成的染料二中，快速摇动20-40min，观察染色情况。

2.根据权利要求1所述的快速染色方法，其特征在于，其包括以下步骤：

步骤S10制作染料一，按体积比25:4分别量取无水乙醇和磷酸混合均匀，使用去离子水定容至无水乙醇终浓度为50％，保存于棕色瓶中备用；

步骤S20制作染料二，按质量比，硫酸铝：硫酸铵＝1：2称取硫酸铝和硫酸铵，混合；以硫酸铝和硫酸铵混合物为基础，按1.5g/ml的比例量取磷酸，按1.5g/ml的比例量取超纯水，将磷酸和超纯水加入到硫酸铝和硫酸铵混合物中，加热搅拌1.5h至完全溶解；再按6mg/ml加入考马斯亮蓝G-250和按体积比，混合物：超纯水＝1:2加入超纯水，常温搅拌30min；搅拌结束后按体积比，混合物：甲醇＝3：1加入甲醇，密封搅拌10min，再按体积比超纯水: 混合物=4:5加入超纯水对混合物定容并保存于棕色瓶中备用；

步骤S30显色反应：从电泳池取出凝胶，浸入超纯水中，轻摇清洗，将水倒干，再将凝胶浸入步骤S10制成的染料一中，轻摇30min，倒出染料一，再将凝胶浸入步骤S20制成的染料二中，快速摇动30min，观察染色情况。

3.根据权利要求1或2所述的快速染色方法，其特征在于，所述的步骤S20中的加热搅拌的搅拌速度为350-450r/min，加热温度为30-50℃。

4.根据权利要求1或2所述的快速染色方法，其特征在于，所述的步骤S20中的常温搅拌的搅拌速度为550-650r/min。

5.根据权利要求1或2所述的快速染色方法，其特征在于，所述的步骤S20中密封搅拌是采用parafilm膜密封。