[发明专利]一种刻节润楠的组培快繁方法在审
申请号: | 201711401107.7 | 申请日: | 2017-12-22 |
公开(公告)号: | CN107926709A | 公开(公告)日: | 2018-04-20 |
发明(设计)人: | 吴永彬 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司44245 | 代理人: | 刘瑜,裘晖 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 刻节润楠 组培快繁 方法 | ||
1.一种刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)无菌苗的获得:将刻节润楠种子包在纱布中,先用水冲洗,接着用酒精溶液浸泡、无菌水冲洗,然后消毒、无菌水冲洗,再用灭菌滤纸吸干种子表面的残留水分,最后接种于装有基本培养基的培养瓶中进行培养,得到外植体丛生芽;
(2)增殖培养:将步骤(1)中得到的外植体丛生芽接种于增殖培养基中进行培养,每60d(天)继代一次,得到幼苗;
(3)生根培养:将步骤(2)中得到的幼苗切段,再接种于生根培养基中进行生根培养。
2.根据权利要求1所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的基本培养基为添加0.7%(w/w)琼脂和25%(w/w)蔗糖,pH为5.8的基本培养基;
步骤(2)中所述的增殖培养基为:Read+1.0mg/L ZT+0.03mg/L IBA+2.5%~3.5%(w/w)蔗糖;
步骤(3)中所述的生根培养基的配方为:1/2WPM+1.5mg/L IBA。
3.根据权利要求1所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的基本培养基为添加1/4MS、0.7%(w/w)琼脂和25%(w/w)蔗糖,pH为5.8的基本培养基;
步骤(3)中所述的生根培养基的配方为:1/2WPM+1.5mg/L IBA+0.1%(w/w)活性炭。
4.根据权利要求1所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的酒精溶液的浓度为体积百分比75%。
5.根据权利要求1所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的消毒为采用0.1%升汞加吐温-20消毒90s。
6.根据权利要求1所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的用水冲洗的时间为1.5h;
步骤(1)中所述的酒精溶液浸泡的时间为150s;
步骤(1)中所述的无菌水冲洗的次数为5次。
7.根据权利要求1~6任一项所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:还包括炼苗和移栽的步骤。
8.根据权利要求7所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于,所述的炼苗和移栽通过如下步骤实现:
(I)生根培养15~60d后,将培养瓶转移到室温、自然光照环境下培养4~6d,然后将培养瓶盖子拧松,继续培养8d,得到植株幼苗;
(II)将植株幼苗置于流水下洗去植株根部的培养基(生根培养基),然后将植株根部浸泡于药剂内2~2.5h,再移栽于基质中进行培养,移栽后的前10d内,遮膜进行保湿,第10d后,逐渐撤膜;其中,所述的药剂为浓度为5ppm的5-氨基乙酰丙酸溶液;
(III)撤膜15d后,浇灌5-氨基乙酰丙酸溶液,每隔15d重复浇灌一次;其中,所述的5-氨基乙酰丙酸溶液的浓度为50~60ppm。
9.根据权利要求8所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(III)中所述的5-氨基乙酰丙酸溶液的浓度为50ppm。
10.根据权利要求8所述的刻节润楠的组培快繁方法,其特征在于:
步骤(II)中所述的基质为泥炭土和珍珠岩按体积比3:1配比得到的基质;
步骤(II)中所述的培养条件为:相对湿度80~85%。
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