[发明专利]一种基因枪介导的雷公藤遗传转化方法有效
| 申请号： | 201711402040.9 | 申请日： | 2017-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN108148871B | 公开（公告）日： | 2020-08-25 |
| 发明（设计）人： | 黄璐琦;高伟;赵瑜君;郭娟 | 申请（专利权）人： | 中国中医科学院中药研究所 |
| 主分类号： | C12N15/89 | 分类号： | C12N15/89;C12N15/29;C07K14/415;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;何叶喧 |
| 地址： | 100700 北京市东城区东*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基因 枪介导 雷公藤 遗传 转化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种雷公藤的遗传转化的方法，包括如下步骤：采用基因枪法将含有目的基因的质粒导入雷公藤悬浮细胞；
所述基因枪法中，基因枪轰击的参数设置如下：DNA浓度：2µg/µl；轰击次数：3次；目标距离：3cm；轰击压力：1100psi；真空度：28mmHg；所述基因枪法中，完成基因枪轰击后，共培养的时间为48h；所述基因枪法中，用微载体和含有目的基因的质粒制备包埋微载体时，采用的沉淀剂为氯化钙或氯化钙溶液。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述共培养采用共培养培养基；所述共培养培养基由溶质和溶剂组成；溶质及其在共培养培养基中的浓度为4.43g/L MS，0.5 mg/L 2,4- D，0.1 mg/L KT，0.5 mg/L IBA，30g/L蔗糖，7g/L琼脂；溶剂为水。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述雷公藤悬浮细胞在转化前采用预培养基进行预培养；所述预培养基为含有0.5mg·L-1 2,4-D、0.1 mg·L-1 KT和 0.5mg·L-1IBA的MS固体培养基。
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