[发明专利]用于鉴定桃花粉育性性状的单核苷酸多态性标记位点、引物对、试剂盒及应用有效
申请号: | 201711405949.X | 申请日: | 2017-12-22 |
公开(公告)号: | CN107858448B | 公开(公告)日: | 2021-01-01 |
发明(设计)人: | 曹珂;王力荣;朱更瑞;方伟超;陈昌文;王新卫;孟歌 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州华隆知识产权代理事务所(普通合伙) 41144 | 代理人: | 经智勇 |
地址: | 450004 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 桃花 粉育性 性状 核苷酸 多态性 标记 引物 试剂盒 应用 | ||
1.一种SNP分子标记在鉴定或辅助鉴定桃花粉育性性状中的应用,其特征在于,所述SNP分子标记序列如SEQ ID NO.1所示,其中,Y表示C或T。
2.一种SNP分子标记在桃花粉育性性状分子标记辅助选择育种方面的应用,其特征在于,所述SNP分子标记序列如SEQ ID NO.1所示,其中,Y表示C或T。
3.一种试剂盒在辅助选择育种方面的应用,其特征在于,所述试剂盒包括PCR扩增引物对和单碱基延伸引物,其中,引物对中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;单碱基延伸引物为如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。
4.一种利用SNP分子标记鉴定桃花粉育性性状的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)PCR扩增:以待测桃的基因组DNA为模板,用PCR扩增引物对进行PCR扩增,获得PCR扩增产物;
(2)SAP反应:配制SAP反应体系,加入至步骤(1)PCR扩增反应后的反应体系中,除去PCR扩增反应中未反应的dNTP;
(3)单碱基延伸反应:配制单碱基延伸反应体系,加入至步骤(2)SAP反应后的反应体系中;
(4)基因分型:将完成单碱基延伸反应的产物进行树脂脱盐处理,点在芯片上,由芯片扫描仪扫描,检测分析,根据不同产物的分子量大小进行基因分型,预测桃花粉育性性状;
其中,PCR扩增引物对中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;单碱基延伸反应体系中的单碱基延伸引物为如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。
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