[发明专利]一种水青冈属植物组培的培养基及其培养方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，尤其涉及一种水青冈属植物组培的培养基及其培养方法。

背景技术

目前，我国水青冈木材，广泛用于装饰板、贴面板、地板、墙板、胶合板、家具和建筑材等，同时还是很好的油料树种。在林业生产上，一方面由于水土流失、环境污染日趋严重，引致森林衰竭；另一方面人为对森林资源过度采伐，这些都造成了水青冈属植物数量急剧减少。水青冈属植物的木材多为珍贵木材，由于历史的原因和传统的生产习惯，目前，以水青冈属植物为原来的产品，在国际、国内市场供不应求，除了精加工方面还存在问题外，主要原因是现存资源贫乏，不利于产业化生产，所以加速水青冈属植物的繁殖，一方面可促进我国创汇林业的发展，另一方面可改善生态环境，有助于可持续林业的形成和发展。在生产上，水青冈属常用种子繁殖。利用种子繁殖会使实生苗群体内存在遗传分化，实生繁殖分化大，种苗生产成为该科植物产业开发的瓶颈。为了选育生长一致性较好的种苗，对生物量大和精油含量高的优良单株进行繁殖显得十分必要。

综上所述，现有技术存在的问题是：由于水青冈属植物具有较高的经济价值，目前被广泛开发利用，造成资源贫乏，在市场上供不应求；种子繁殖发芽率低，自然发芽率不足3％，人工处理，发芽率仅30％；种子繁殖遗传分化大，不能保持母株优良性状，且种苗生长一致性差。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种水青冈属植物组培的培养基及其培养方法。

本发明是这样实现的，一种水青冈属植物组培的培养基，所述水青冈属植物组培的培养基包括：取材时期是：4月份；

启动培养基：叶，MS+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+蔗糖25g/L；茎，MS+2，4-D 1.0mg/L+6-BA1.5mg/L+蔗糖30g/L；

对愈伤组织的生长的糖源为：蔗糖30g/L和食用白糖20g/L；

愈伤组织分化的培养基：MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L；

生根的培养基：1/2MS+NAA1.5mg/L+蔗糖30g/L。

本发明的另一目的在于提供一种所述水青冈属植物组培的培养基的水青冈属植物的培养方法，所述水青冈属植物的培养方法包括以下步骤：

步骤一，水青冈属植物材料取材，流水冲洗，在无菌条件下用70％～75％酒精表面消毒30s；在无菌条件下先用70％酒精浸润30s，用0.2％HgCl₂+吐温80消毒7min，再用无菌水冲洗8次；

步骤二，培养基pH值为5.8～6.0；

步骤三，叶片切成5mm²大的小块，叶背面接触培养基接种在培养基上；将茎段切成1～2cm长的小节接种在培养基上；每个培养基接种2个外植体进行启动培养；

步骤四，将愈伤组织转移到分化培养基上培养；

步骤五，将仅有茎叶的祖培苗转移到生根培养基中，进行后期继代培养。

进一步，所述步骤一中流水冲洗1h后，用去污粉浸泡10min，流水冲洗10min。

进一步，所述步骤二中培养箱条件为：温度25±2℃，空气湿度为40％～70％，光照时间12h/d，光照强度为2000～3000lux。

进一步，所述步骤三中叶片和茎段愈伤组织的诱导分别需10d和16d。

本发明的另一目的在于提供一种利用所述水青冈属植物组培的培养基培养的水青冈属植物。

本发明消毒后茎段存活率可以达到54％，叶存活率达到80％。诱导后叶片和茎段成愈率分别为86.0％和75.5％，所需时间分别是10d和16d。分化培养20d后，愈伤组织开始有褐变现象，但也有肉眼可见的绿色芽点。生根培养30天即可成苗，可以进行炼苗移栽。整个培养期共3个月左右。后期培养可以通过反复培养、分离愈伤组织，然后通过分化培养和生根培养，产生大量组培苗。理论上，只要设备、资金充足，可以无限增殖。

本发明利用组织培养技术繁殖苗木，不受季节、时间的影响，可大大提高繁殖系数和工作效率，进行规模化和商业化生产；利用微型繁殖所得的材料建立采种园，迅速获得大量优质枝条；微型繁殖材料的低温保存不仅节约空间，一旦有需要即可恢复生长，扩大繁殖；利用微型繁殖技术还能获得高度一致同时具有良好表型的群体，可获得无病毒苗木，在种质资源保存和加速良种化进程等方面具有十分重要的意义。同时组织培养是生物技术的一个平台，已经成为现代植物科隆技术中必不可少的环节。