[发明专利]一种黄精叶片的离体再生培养方法

权利要求书

1.一种黄精叶片的离体再生培养方法，其特征在于，步骤包括：

（1）外植体选择：选择组培中处于增殖阶段的丛苗，挑选长条形大苗或细针形小芽作为培养材料；

（2）不定芽诱导：将步骤（1）选择的外植体材料的叶片从基部切下，接入不定芽培养基，接种时叶片横放，使基部切口的一半接入培养基中，另一半露在培养基外面，培养30-60天；

所述不定芽培养基为：MS、CPPU 0.5-4 mg/L、2,4-D 0-1 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂4.5 g/L，pH为5.8；

（3）丛生芽增殖：将上一步诱导的不定芽进行切分，单个接入增殖培养基中，培养30-35天；

所述增殖培养基为：MS、CPPU 0-2 mg/L、2,4-D 0-0.5 mg/L、蔗糖30 g/L 、琼脂4.5g/L，pH为5.8；

（4）生根培养：将增殖的丛芽2-3个为一组切下，接种至生根培养基，进行生根培养13-15天；

所述生根培养基为：1/2MS、NAA 0-1 mg/L、IBA 0-1 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂4.5g/L，pH为5.8；

（5）炼苗移栽：待组培苗根长2-4 cm，根数3-6根时，将瓶子放置在炼苗棚中培养1周后打开瓶盖，适量喷水培养3天后移栽至炼苗基质中。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，选择外植体为长条形大苗。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，不定芽培养时，培养条件为温度23±1℃、空气相对湿度50%-60%、光照强度2000Lx，光照时间12小时/天。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，丛生芽培养时，培养条件为温度23±1℃、空气相对湿度50%-60%、光照强度2000Lx，光照时间12小时/天。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（4）中，生根培养时，培养条件为温度23±1℃、空气相对湿度50%-60%、光照强度2000Lx，光照时间12小时/天。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述炼苗基质为泥炭土、珍珠岩或蛭石和细沙，其重量比为5:3:2。