[发明专利]一种复合萃取剂及利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法

说明书

本发明属于发酵工程领域，公开了一种复合萃取剂及利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法，生产的方法包括：将处于对数生长期的红曲菌液体种子以体积比3％～8％的接种量接入发酵培养基中；同时在发酵培养基中加入花生油，加入量为70mL/_L发酵液～180mL/_L发酵液；在温度27℃～33℃的条件下摇瓶培养；向含有红曲菌液体种子、花生油发酵体系中添加非离子表面活性剂Span80，添加量为2.8g/_L发酵液～3.4g/_L发酵液，继续摇瓶发酵等等。本发明添加了该复合萃取剂的发酵液中红、橙、黄三种色素的最终产量相比于对照组分别提高了76％、85％和89％。

技术领域

本发明属于发酵工程领域，尤其涉及一种复合萃取剂及利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法。

背景技术

红曲色素是一种安全的天然色素，对酸碱、氧化剂、还原剂均较稳定，具有热稳定性好、蛋白质着色力强、色调柔和、对pH稳定和抗氧化等特点，可部分代替发色剂亚硝酸盐应用于肉制品、膨化食品、水产品和调味类罐头等着色，因此红曲色素应用具有巨大的市场前景。

目前红曲色素的生产方法主要是液态发酵法，但是这种传统的液态发酵方式面临着两个难题：发酵过程中菌体细胞内产物的高浓度所导致的负反馈抑制；发酵结束后胞内色素分离纯化对有机溶剂的大量消耗。针对以上问题，有研究者发现，采用双液相偶联萃取发酵体系能够促进胞内色素分泌到胞外，解除胞内产物反馈抑制，增加色素产量。

双液相偶联萃取发酵又称“挤奶发酵”，该体系通过向发酵培养基中添加非离子表面活性剂，伴随着浊点系统形成，发酵体系自动形成非离子表面活性剂胶束富集的聚集相和胶束很少的稀相。发酵过程中疏水性红曲色素从胞内萃取到胞外并大量富集在聚集相，从而解除胞内产物反馈抑制，增加色素产量。另外胞内色素被大量分泌到胞外，减少了有机提取溶剂的用量。经对现有文献技术检索发现，目前只有相关团队发现非离子表面活性剂Triton X-100在红曲色素发酵中具有良好的生物相容性和色素萃取能力，(胡志强.表面活性剂胶束溶液中萃取发酵红曲色素的研究[D].华南理工大学,2013.)但Triton X-100的色素萃取能力有限，有待发现更优的萃取剂来大规模提高红曲色素的产量。

综上所述，现有技术存在的问题是：

现在红曲霉发酵领域中，只有Triton X、Tween等几个系列的非离子表面活性剂被研究，我们在这些研究的基础之上筛选出了一种促色素分泌效果更好的非离子表面活性剂Span80。而Span80与植物油的结合会进一步得到更好的色素产量。

目前菌种筛选、发酵条件优化等现有方法达到瓶颈，很难再进一步提高红曲色素产量，进而寻求一种新型的发酵方式即双液相偶联萃取发酵体系。而非离子表面活性剂Span80与花生油按照一定比例混合后作为萃取剂用于红曲色素生产的方法还未有报道。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种复合萃取剂及利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法。

本发明是这样实现的，一种利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法，所述利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法包括：

将处于对数生长期的红曲菌液体种子以体积比3％～8％的接种量接入发酵培养基中；同时在发酵培养基中加入花生油，加入量为70mL/_L发酵液～180mL/_L发酵液；在温度27℃～33℃的条件下摇瓶培养；

向含有红曲菌液体种子、花生油发酵体系中添加非离子表面活性剂Span80，添加量为2.8g/_L发酵液～3.4g/_L发酵液，继续摇瓶发酵；

所述发酵培养基的初始pH为3.0-5.0。

进一步，所述利用复合萃取剂促进红曲色素生产的方法具体包括：