[发明专利]一种公猪冻精采集保存及取用方法

权利要求书

1.一种公猪冻精采集保存及取用方法，其特征在于,包括冻精采集保存方法，所述采集保存方法包括如下步骤：

1.采集精液.放弃公猪射精的前部分及后部分，取中间浓度最高的部分，采集比例不超过公猪射精总量80%，单次单头公猪采集精液为30-80毫升;

2.密度仪检测.将采集来的公猪精液放置于精子密度活力分析仪上分析检测，保证其密度为95%以上，活力在93%以上，畸形率在2%以下，死精率3%以下，任意一项参数不合格则放弃使用并重新采集；

3.38.8度恒温.把采集的精液置于设置好温度为38.8摄氏度水温的水浴锅中恒温放置5-10分钟；

4.制作一级稀释液和二级稀释液.

所述一级稀释液为稀释粉加10%的海澡糖粉后，与1：1体积比的医用蒸馏水混合并搅拌均匀，并使其恒温在38.8摄氏度；

所述二级稀释液为新鲜蛋黄与医用海澡糖粉以1：1体积比的医用海澡糖粉混合并搅拌均匀；

5.一级稀释.步骤3中完成38.8度恒温恒温的精液加入38.8度的一级稀释液进行稀释，精液与一级稀释液的比例为1:1至3，并进行5-8分钟的恒温缓和；

6.二级稀释.将经过一级稀释并缓和过的精液和二级稀释液进行二级稀释并进行3-5分钟的缓和；精液与一级稀释液的比例为1:1至3；

7.分离上清液.把经两级稀释过的精液放入高速分离机分离；去掉精液上层分离出的上清液；

8.17度平衡.把经过分离的精液在17摄氏度下放置平衡1-1.5小时；

9.深度睡眠.经过步骤8平衡后的精液放置在4-6摄氏度下再次平衡

3-6小时；

10.加入抗凝营养剂.把经过深度睡眠的精液放置在容器里，加入抗凝剂后搅拌均匀，所述抗凝剂为医用甘油乳糖与水按1：1体积比调配而成；

精液与抗凝剂的体积比例为1000:2-4；

11.装管.把加入抗凝剂的精液注入冻精专用管并封口；

12.液氮漂浮冷冻.把装管后的冻精专用管放入装入液氮保温箱，使冻精专用管漂浮在液氮表面进行漂浮冷冻15-30秒；

13.液氮长期保存.把进入漂浮冷冻的冻精专用管迅速拿出并收到液氮罐容器里进行长期保存；

还包括取用方法，所述取用方法包括如下步骤：

14.将冻精专用管快速从液氮罐中取出，并放入38-42摄氏度恒温水浴锅中解冻15-30秒后取出；

15.把解冻过的冻精专用管一端剪开倒入盛有与步骤14中恒温温度相同的蒸馏水的输精瓶中恒温储藏备用;

16.把经过上述工序的解温冻精液，配合深度输精管进行母猪人工授精。

2.如权利要求1所述的公猪冻精采集保存及取用方法，其特征在于，所述步骤7中高速分离机分离时采用如下任意一种方式：离心力为800g分离15分钟；离心力为2000g分离8分钟，g表示重力加速度。

3.如权利要求1所述的公猪冻精采集保存及取用方法，其特征在于，所述步骤11中采用超声波封口机进行封口。

4.如权利要求1所述的公猪冻精采集保存及取用方法，其特征在于，所述步骤14中的恒温水浴锅温度为40摄氏度。