[发明专利]氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的应用及聚合酶链式反应的方法在审
申请号: | 201711417174.8 | 申请日: | 2017-12-25 |
公开(公告)号: | CN108048542A | 公开(公告)日: | 2018-05-18 |
发明(设计)人: | 钟勇;吴雄清;余德锋 | 申请(专利权)人: | 信利光电股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张雪娇;赵青朵 |
地址: | 516600 广东省汕尾*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氧化 石墨 聚丙烯 复合物 应用 聚合 链式反应 方法 | ||
本发明提供了一种氧化石墨烯聚丙烯酸复合物在聚合酶链式反应中的应用。与现有技术相比,本发明在聚合酶链式反应中添加氧化石墨烯聚丙烯酸复合物,在低浓度的氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的条件下,PCR各组分能够被吸附在氧化石墨烯聚丙烯酸复合物表面,使反应在其表面上进行,特异性明显增强,不会有其他扩增产物产生。
技术领域
本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的应用及聚合酶链式反应的方法。
背景技术
自从聚合酶链式反应(PCR)问世以来,人们就不断尝试着通过添加外来物质对它进行优化改良。传统添加剂改进PCR的空间越来越小,表现出难以克服的局限性。因此,人们试图转变观念,从新兴材料中寻求突破,寻找替代品。2012年,Sun课题组首次研究并报道了石墨烯能增强PCR的特异性:以pET-32a质粒为模板,比较了氧化石墨烯和还原石墨烯对PCR的影响,发现在一定浓度范围内,均能增强PCR特异性,并表现出明显的浓度依赖性和模板依赖性。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的应用及聚合酶链式反应的方法。
本发明提供了一种氧化石墨烯聚丙烯酸复合物在聚合酶链式反应中的应用。
本发明还提供了一种氧化石墨烯聚丙烯酸复合物作为聚合酶链式反应特异性增强剂的应用。
优选的,所述聚合酶链式反应的体系中氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的浓度为0.8~6.4μg/ml。
本发明还提供了一种聚合酶链式反应的方法,包括:
S1)将聚合酶链式反应体系依次进行热变性、退火与延伸,完成DNA的半保留复制;所述聚合酶链式反应体系中包括氧化石墨烯聚丙烯酸复合物;
S2)反复重复热变性、退火与延伸的步骤,完成聚合酶链式反应。
优选的,所述氧化石墨烯聚丙烯酸复合物按照以下步骤制备:
S)在引发剂存在的条件下,将氧化石墨烯与丙烯酸单体混合反应,得到氧化石墨烯聚丙烯酸复合物。
优选的,所述步骤S)具体为:
将氧化石墨烯与丙烯酸单体混合,除去混合体系中的氧气后,加入引发剂,加热反应后,得到氧化石墨烯聚丙烯酸复合物。
优选的,所述氧化石墨烯与丙烯酸单体的质量比为(0.01~0.1):1。
优选的,所述氧化石墨烯以氧化石墨烯溶液的形式与丙烯酸单体混合;所述氧化石墨烯溶液的浓度为0.5~5mg/ml。
优选的,所述加热反应后,加水稀释反应体系,超声后透析,离心,得到氧化石墨烯聚丙烯酸复合物。
优选的,所述氧化石墨烯聚丙烯酸复合物中聚丙烯酸的接枝率为10%~40%。
本发明提供了一种氧化石墨烯聚丙烯酸复合物在聚合酶链式反应中的应用。与现有技术相比,本发明在聚合酶链式反应中添加氧化石墨烯聚丙烯酸复合物,在低浓度的氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的条件下,PCR各组分能够被吸附在氧化石墨烯聚丙烯酸复合物表面,使反应在其表面上进行,特异性明显增强,不会有其他扩增产物产生。
附图说明
图1为本发明提供的氧化石墨烯聚丙烯酸复合物的制备流程示意图;
图2为聚合酶链式反应的流程示意图;
图3为本发明实施例中PCR产物的电泳图。
具体实施方式
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