[发明专利]一种土壤生物活化剂及其制备方法

权利要求书

1.一种土壤生物活化剂，其特征在于，所述活化剂是通过将菌种接种到发酵培养基中，先进行好氧发酵培养，然后加入溶菌酶进行厌氧发酵制得的，

所述菌种为酿酒酵母菌、戊糖乳杆菌、纳豆芽孢杆菌和植物固氮细菌；

其中，所述酿酒酵母菌种子液的活菌浓度为2.5亿/ml；

所述纳豆芽孢杆菌种子液的活菌浓度为10亿/ml；

所述戊糖乳杆菌种子液的活菌浓度为6.5亿/ml；

所述植物固氮菌种子液的活菌浓度为3亿/ml；

所述酿酒酵母菌、纳豆芽孢杆菌、戊糖乳杆菌、植物固氮菌的种子液按体积比为100:1:1:1进行混合均匀，得到菌种的总活菌浓度为2.6亿/ml；

所述发酵培养基的组成为以下按重量百分比计的原料：

米浆5～20%，

黄豆粕5～10%，

玉米粉5～10%，

麸皮5～10%，

糖蜜2～10%，

硫酸镁0.5～2%，

磷酸二氢钾0.5～2%，

醋酸钴0.05～0.5%，

无菌水40%～60%；

所述发酵培养基的pH值为6.0±0.2；

所述溶菌酶的加入量为发酵物料总重量的0.01-0.1%。

2.根据权利要求1所述的土壤生物活化剂，其特征在于，所述菌种的接种量占发酵物料总体积的5%～15%。

3.根据权利要求1所述的土壤生物活化剂，其特征在于，所述菌种是通过如下步骤制备得到：

（1）将酿酒酵母菌接种到麦芽汁琼脂斜面上进行活化，然后将活化后的酵母菌接种到10～13°BX的麦芽汁液体培养基中，再将培养得到的种子液接种到液体培养基中进行发酵，得到酿酒酵母菌种子液，所述酿酒酵母菌种子液的活菌浓度为2～5亿/ml；其中，所述液体培养基包括按重量比计的2-10%麦芽浸粉，1-5%大豆蛋白胨，1-5%葡萄糖、1-5%酵母浸膏；

（2）将纳豆芽孢杆菌接种到PDA斜面上进行活化，然后将活化后的纳豆芽孢杆菌接种到PDA液体培养基中，再将培养得到的种子液接种到PDA液体培养基中进行发酵，得到纳豆芽孢杆菌种子液，所述纳豆芽孢杆菌种子液的活菌浓度为5～20亿/ml；

（3）将乳酸菌接种于MRS斜面上进行活化，然后将活化后的乳酸菌接种到MRS液体培养基中，再将培养得到的种子液接种到MRS液体培养基中进行发酵，得到乳酸菌种子液，所述乳酸菌种子液的活菌浓度为5～10亿/ml；

（4）将植物固氮菌接种到PDA斜面上进行活化，然后将活化后的植物固氮菌接种到费道罗夫固氮液体培养基中，再将培养得到的种子液接种到费道罗夫固氮液体培养基中进行发酵，得到植物固氮菌种子液，所述植物固氮菌种子液的活菌浓度为2～10亿/ml；

（5）将上述种子液按比例进行混合均匀，得到所述菌种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的土壤生物活化剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将发酵培养基，灭菌后，冷却至室温；

（2）将菌种接种到发酵培养基中，于25～28℃，以100～300rpm的速度进行搅拌，通入1～2m³/h无菌空气，进行好氧发酵15～20h；

（3）加入发酵物料总重量的0.01-0.1%的溶菌酶，于25～28℃下，进行厌氧发酵7～10天；

（4）经100～200目过滤，加入发酵物料总重量的0.1～0.3%的保护剂后，进行灌装、封口。

5.根据权利要求4所述的土壤生物活化剂的制备方法，其特征在于，所述保护剂为抗坏血酸、山梨酸钾和苯甲酸钠按重量比为1-4:10-20:10-20混合得到。