[发明专利]长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白、制备方法及应用

说明书

本发明公开一种长牡蛎干扰素调节因子CgIRF‑1基因重组蛋白，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。制备方法依次按照如下步骤进行：用引物P1和P2对长牡蛎干扰素调节因子CgIRF‑1基因编码区片段进行PCR扩增；将PCR扩增产物与pET‑30a载体经Nde I、Xho I酶切后通过连接酶连接，转化，测序鉴定重组子；将上述重组子转入大肠杆菌BL21（DE3）表达菌株中进行诱导培养，而后纯化、复性即可。所述长牡蛎干扰素调节因子CgIRF‑1基因重组蛋白可应用于制备免疫增强剂。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，尤其涉及一种长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白、制备方法及应用。

背景技术

长牡蛎是一种重要的海水养殖贝类。由于长牡蛎缺乏适应性免疫防御系统，主要依赖固有免疫系统抵御外源病原微生物的侵染，因此细菌、真菌和病毒引起的多种疾病在长牡蛎的养殖群体中不断爆发，造成了巨大的经济损失。

干扰素（IFN）是一类能够抵抗病毒感染，抑制细胞周期和行使免疫调节功能的细胞因子。干扰素调节因子（IRFs）是调节干扰素（IFN）、干扰素刺激基因（ISG）以及其它相关基因表达的重要转录因子，能够与干扰素（IFN）或者干扰素刺激基因（ISG）上游启动子区含有5’-GAAA-3’保守基序的DNA序列相结合，并通过调节IFN、ISG和其它密切相关基因的表达而发挥多种生物学效应。在脊椎动物中，已经鉴定出了11个IRF，分别是IRF-1 至IRF-11。所有的IRFs成员在其N端都含有一个保守的螺旋-转角-螺旋型的IRF结构域，又称为DNA锚定结构域。在这个结构域中含有5个保守的色氨酸残基（Trp），这5个保守的残基对识别含有5’-GAAA-3’四核苷酸的DNA序列具有重要作用。IRFs成员IRF-1和IRF-2的C端分别含有一个保守性很低的激活结构域和抑制结构域。研究发现，IRF-1与IRF-2不仅参与病毒防御，还在细胞增殖、分化、凋亡等细胞反应以及很多疾病的调节等发面发挥着重要作用。

但是，迄今为止并没有关于长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白、制备方法及在制备免疫增强剂中应用的相关报道。

发明内容

本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白、制备方法及应用。

本发明的技术解决方案是：一种长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白，其特征在于：氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

一种上述长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白的制备方法，其特征在于依次按照如下步骤进行：

a. 用引物P1和P2对长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因编码区片段进行PCR扩增；

b. 将PCR扩增产物与pET-30a载体经Nde I、Xho I酶切后通过连接酶连接，转化，测序鉴定重组子；

c. 将上述重组子转入大肠杆菌BL21（DE3）表达菌株中进行诱导培养，而后纯化、复性，即得到具有序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列的重组蛋白。

一种上述长牡蛎干扰素调节因子CgIRF-1基因重组蛋白在制备免疫增强剂的应用。