[发明专利]一种嗜酸乳杆菌NCFM耐酸保护剂

权利要求书

1.海藻糖在胃酸环境下保护嗜酸乳杆菌NCFM的应用，其特征在于，

按照体积比为2∶3将浓度为7×10⁹ cfu/mL的菌悬液与海藻糖溶液混合均匀，在pH3.0的酸性环境下，海藻糖溶液浓度为20～40 g/L；在pH2.0的酸性环境下，海藻糖溶液浓度为100～200 g/L；在pH1.0的酸性环境下，海藻糖溶液浓度为200 g/L；

所述的嗜酸乳杆菌NCFM，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区酒仙桥中路24号院6号楼中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CICC 22150，保藏时间：2008年2月22日。

2.如权利要求1所述的海藻糖的应用，包括步骤如下：

（1）嗜酸乳杆菌NCFM的活化：将保藏于甘油管中的嗜酸乳杆菌NCFM于MRS固体平板培养基中划线，于37℃恒温培养24h；然后将生长出的单菌落接入装有100 mL MRS液体培养基的250 mL锥形瓶中，于37℃恒温培养24h；再将培养好的嗜酸乳杆菌NCFM于MRS固体平板培养基中划线，于37℃恒温培养24h；最后将生长出的单菌落接入装有100 mL MRS液体培养基的250 mL锥形瓶中，于37℃恒温培养24h，完成嗜酸乳杆菌NCFM的活化；

（2）嗜酸乳杆菌NCFM种子液的制备：将活化好的嗜酸乳杆菌NCFM接入装有100 mL MRS液体培养基的250 mL锥形瓶中，于37℃恒温培养24h；

（3）取种子液离心收集菌体，生理盐水清洗菌体2～4次，再用生理盐水将菌体重悬配制成浓度为7×10⁹ cfu/mL的菌悬液，将菌悬液与海藻糖溶液混合，置于酸性环境下。

3.如权利要求2所述的海藻糖的应用，其特征在于，所述MRS液体培养基的配方如下：蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1mL，磷酸氢二钾2.0g，三水乙酸钠5.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，七水硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，水1000mL。

4.如权利要求2所述的海藻糖的应用，其特征在于，所述MRS固体平板培养基的配方如下：蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1mL，磷酸氢二钾2.0g，三水乙酸钠5.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，七水硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，水1000mL，琼脂粉20.0g。