[发明专利]一种空心李高接换冠的砧芽配置方法

说明书

本发明涉及一种空心李高接换冠的砧芽配置方法，属于植物嫁接栽培技术领域。主要技术方案如下：分别提取不同种质空心李、砧木苗的叶片基因组DNA，所述砧木苗的最初接穗均来自同一母树；利用多态性空心李SSR标记引物，对空心李、砧木苗叶片基因组DNA进行PCR扩增；根据PCR扩增条带结果，计算不同种质空心李与砧木苗之间的遗传距离；选择遗传距离介于0‑0.0081之间、且果实品质性状优良的空心李，设计嫁接组合；采用带木质部芽接的方法进行空心李高接换冠。本发明针对低产和果实品质不佳的根蘖苗和扦插苗，利用种质间分子遗传距离识别技术和木质部芽接方法，实现空心李优质种质的高接换冠。

技术领域

本发明涉及植物嫁接栽培技术领域，具体涉及一种空心李高接换冠的砧芽配置方法。

背景技术

李为蔷薇科(Rosaceae)李亚科(Prunoideae)李属(Prunus L.)多年生乔木。沙子空心李，因成熟时果核与果肉自然分裂而得名，至今已有130多年栽培历史，其果肉呈黄白色，硬度适中、脆嫩、汁多爽口、清香浓甜，有“人间鲜果、李中茅台”的美誉。2006年被国家质量技术监督管理总局认定为“国家地理标志保护产品”。近年来，采用根蘖苗和非良种嫁接苗建园，导致果实品质(果实大小、口感、果皮厚度等)逐年下降。主要原因是缺乏空心李优良品种及良种苗木供应不足，另外，由于沙子空心李种子发育问题(空籽或瘪籽)，难以通过杂交方法选育新品种。

在专利“李子的嫁接方法”(申请号201610117517.8)中，以50cm李子苗为砧木，在离地20cm处嫁接中年树枝。该专利中未涉及采用优良种质分子识别的砧芽配置技术。目前，许多地区，尤其沿河县，很少用李子做嫁接砧木，而且沿河县沙子空心李种子常发育不成熟，难以获得李子砧木苗。

发明内容

为弥补现有技术的不足，本发明针对低产和果实品质不佳的根蘖苗和扦插苗，利用种质间分子遗传距离识别技术和木质部芽接方法，实现空心李优质种质的高接换冠。

本发明的技术方案如下：一种空心李高接换冠的砧芽配置方法，包括如下步骤：

(1)分别提取不同种质空心李、砧木苗的叶片基因组DNA，所述砧木苗的最初接穗均来自同一母树；目前农户大多数栽植的商用苗，是以一年生毛桃为砧木，空心李为接穗，利用低接的方法获得的。采用同一空心李母树做接穗的目的是为了后续试验，尽量保证二次作为砧木时，遗传背景相同；

(2)利用多态性空心李SSR标记引物，对步骤(1)得到的空心李、砧木苗叶片基因组DNA进行PCR扩增；

(3)根据步骤(2)PCR扩增条带结果，计算不同种质空心李与砧木苗之间的遗传距离；

(4)选择遗传距离介于0-0.0081之间、且果实品质性状优良的空心李，设计嫁接组合；

(5)将步骤(4)设计的嫁接组合，采用带木质部芽接的方法进行空心李高接换冠。

进一步的，所述步骤(2)多态性空心李SSR标记引物的筛选方法包括如下步骤：

1)基于RNA-Seq技术开发SSR标记；

2)利用聚丙烯酰胺凝胶电泳结果，筛选多态性空心李SSR标记引物。

本发明的有益效果如下：

(1)本发明基于RNA-Seq技术开发空心李SSR标记引物，利用多态性SSR标记引物检测获得不同空心李种质间的遗传距离，结合近缘种质和果实优质性状配置砧芽组合，采用带木质部芽接方法进行高接换冠，嫁接成活率达到80％以上，为空心李提质增效提供高接换冠嫁接设计模式。

(2)本发明利用等位基因位点方法统计SSR引物扩增条带，相对0、1统计方法能更准确的计算各种质间遗传距离。