[发明专利]用于定量样品中目标分析物的组合物、方法和试剂盒

说明书

一种通过质谱法定量目标分析物的方法，所述方法包括获得质谱信号，所述质谱信号包括第一校准物信号、包括第二校准物信号，并且可能包含来自单个样品的目标分析物信号，所述单个样品包含第一已知量的第一校准物、包含第二已知量的第二校准物，并且潜在包含目标分析物。所述第一已知量和所述第二已知量不同，并且其中所述第一校准物、所述第二校准物以及所述目标分析物可通过质谱法在所述单个样品中各自区分。所述方法还包括使用所述第一校准物信号、所述第二校准物信号，以及所述目标分析物信号来定量所述单个样品中的所述目标分析物。

本申请是2012年6月6日提交的题为“用于定量样品中目标分析物的组合物、方法和试剂盒”的国家申请号为2012800368101(PCT/US2012/041124)的发明专利申请的分案申请。

技术领域

相关申请

本申请要求2011年6月6日提交的欧洲专利申请第11168854.5号，以及2012年5月21日提交的美国临时申请第61/649,413号的优先权。上述申请的全部内容通过引用并入本文。

本发明通常涉及用于定量样品中一种或更多种目标分析物的组合物、试剂盒、方法和装置。本发明更特别地涉及质谱法分析，其中存在的单个样品包含第一已知量的第一校准物和第二已知量的第二校准物，并且其中第一校准物、第二校准物，以及相应的目标分析物可通过质谱法在单个样品中各自区分。

背景技术

质谱法(MS)是尘命科学中的主要发现工具。通过使用该分析技术，有可能通过离子化所述样品中含有的样品或分析物分子，并且然后测量所得到的离子的质荷比来分析样品的分子组成。通过MS实验获得的质谱可用于鉴别、表征，以及定量感兴趣的分析物的丰度。特别地，液相色谱-质谱法(LC-MS)最近已经被用于药物和生物活性化合物的定量，主要由于LC/MS/MS赋予的高选择性、灵敏度、速度，和简单。

对于样品中目标分析物的定量，通常必须首先建立校准曲线，所述校准曲线表示由所用的特定分析方法获得的分析信号(例如，MS光谱或质谱图中的峰面积或峰高)与目标分析物的量之间的关系。因此，在分析样品之前，必须测定一系列校准标准的分析信号(例如，六个不同浓度的分离日标分析物)并且必须定期(例如，每天)进行该外部校准。然而，该程序降低生产率，增加每个样品的成本，并且此外，使得仅一个样品的分析无效。

发明概述

本发明提供用于通过质谱法定量样品中的目标分析物的组合物、试剂盒、方法和装置，而不依赖于常规校准及其相关的的缺点和劣势。通常，本发明提供MS分析，其中存在包含第一已知量的第一校准物和第二已知量的第二校准物的单个样品，并且其中第一校准物、第二校准物，以及目标分析物可通过质谱法在单个样品中各自区分。

除了消除常规校准品的无效以外，本发明提出基质效应的问题，所述问题造成在样品中目标分析物的定量分析中使用MS的主要问题(例如，因为与目标分析物共同提取的基质可能改变信号响应，导致差的分析准确度、线性和重现性)。例如，不同个体的样品可能在所用的分析体系中具有不同的行为并且可能与校准标准的行为不同。因此，使用常规方法的准确分析需要提供基于基质的校准标准，例如，不含目标分析物并且含有校准标准的基质。然而，可能难以获得此类不含目标分析物的基质，特别是对于通常预期存在于该基质中的目标分析物(例如，血浆中的甾体)。