[发明专利]一种手性醇的酶催化制备方法

说明书

本发明涉及一种手性醇的酶催化制备方法，该方法条件温和、简便，后处理简单，工艺条件稳定，有效的缩短了生产周期，提高了整体收率，节约生产成本，环境友好，减少了有机溶剂对环境的污染，适于放大生产。

技术领域

本发明涉及一种手性醇的酶催化制备方法，本发明属于有机合成领域。

背景技术

手性醇作为重要中间体，广泛用于手性药物和其他手性精细化学品的合成，国内外已有许多相关的合成报道。(R)-2-羟基-3-(苄氧基苯基)丙酸乙酯作为制备骨髓细胞白血病1(MCL1)抑制剂的关键中间体，Nature，2016，538，477–482及WO2016207225等文献中公布的化合物的合成方法均为将乙酸-2-甲基苯基酯通过Wohl-Ziegler反应上溴，再与乙醛酸乙酯通过格氏反应制得得到消旋的2-乙酰氧基-3-(2-羟基苯基)丙酸乙酯，第二步格氏反应需要严格控制无水条件，对设备要求高，两步反应制备得到消旋体的收率仅23％，再通过手性色谱柱分离得到单一构型目标产品，整体收率低，且手性柱色谱分离成本高、周期长，不适合工业化放大生产，将拆分所得的单一构型产品脱除乙酰基保护后可得到手性醇化合物。生物酶催化制备手性化合物的方法，反应条件温和，立体选择性高、对环境友好，弥补了化学方法的不足。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的是提供一种手性醇的酶催化制备方法，更具体的本发明的制备方法可以用如下流程表示：

其中，R₁选自苄基、C_2-6的烷氧基烷基和C_1-6烷基，优选为苄基、甲氧基甲基、甲基和乙基；R₂为直链或支链的C_1-6烷基，优选为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基；

更具体的，本发明的手性醇的酶催化制备方法包含如下步骤：

惰性气体保护下，将酶PS Amano SD(简称为PS-SD)均匀的分散于缓冲溶液中，与前体醇化合物II的第一有机溶液混合搅拌制备得到化合物Ia和化合物Ib；所述酶的用量为0.015～0.06g/g化合物II，优选为0.02～0.05g/g化合物II；所述第一有机溶剂选自叔丁基甲基醚、乙醚、甲苯、二氧六环、正己烷、正庚烷、二氯甲烷、氯仿中的一种或多种；所述反应温度为5～40℃，优选为20～30℃；所述反应时间以检测原料反应完全为止。

优选的，所述缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液；所述磷酸盐缓冲溶液可选自磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液、磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钠-氢氧化钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钾缓冲液，更优选为磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液和磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液，所述缓冲溶液可依据本领域常规方法配置；所述缓冲液的pH为6.5～8.5，优选为pH为7.0～8.0；所述反应过程中，可通过补加氢氧化钠或氢氧化钾水溶液控制反应体系pH；

更具体的，本发明的手性醇的酶催化制备方法包含如下后处理方法：

反应结束后，过滤、分液，水相用第二有机溶剂萃取，合并有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品化合物Ia，将所得粗品化合物Ia在第三有机溶剂中打浆即可得到纯品化合物Ia；将上述分液所得水相，用柠檬酸调节pH至5左右，加入第二有机溶剂萃取，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品化合物Ib，将所得粗品化合物Ib在第三有机溶剂中打浆即可得到纯品化合物Ib；所述第二有机溶剂选自甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿中的一种或多种；所述第三有机溶剂选自石油醚、正己烷、正庚烷中的一种或多种；

更进一步的，所述的化合物II可依据下述方法制备得到：

其中，R₁，R₂的定义如前；X选自氯、溴或碘；