[发明专利]一种氨基酸序列在识别气味化合物中的应用

说明书

本申请涉及一种氨基酸序列在识别气味化合物中的应用。具体涉及如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列在识别气味化合物中的应用。所述气味化合物为反‑2‑己烯醇、肉桂醛、苯乙酸甲酯、4‑乙基苯乙酮、反‑3‑己烯醇和正辛醇中的至少一种。

技术领域

本申请涉及一种氨基酸序列在识别气味化合物中的应用。

背景技术

棉铃虫(Helicoverpa armigera)，属于鳞翅目、夜蛾科害虫，在中国多个省份及世界上其他地区广泛分布。其幼虫具有高度杂食性，取食包括玉米、大豆、棉花、番茄等主要经济作物在内的120多种植物，造成严重的经济损失。其成虫具有高度迁移性，雌虫具有很强的产卵能力，最高可产1000多颗卵，而雄虫被报道可多次交配，因此棉铃虫的防治是很大的难题。农药的大面积使用带来多种问题，如生态污染，害虫抗性增加等。害虫综合治理(IPM)一直是被国际上多个国家大力支持的防治策略。在中国，转基因作物的推广种植(如转Bt棉花、转Bt玉米)有效地控制了棉铃虫的大面积危害。然而，近年来棉铃虫对Bt产生抗性已多有报道，可以预见转基因作物将面临的靶标害虫抗性增加的越来越严峻的挑战。

植物挥发物在昆虫取食、交配、产卵等重要生物学活动中发挥的重要作用已经被充分证明。对于棉铃虫，很多行为学实验表明寄主植物如棉花、大豆、烟草的多种挥发物组分对其雌、雄蛾有引诱作用。

然而，对于植物源的昆虫引诱剂组分的开发，传统的方法遇到的主要问题有：1.工序复杂：挥发物组分鉴定过程操作复杂；2.工作量大：植物挥发物组分数量众多，利用行为学试验逐一验证不同组分的引诱效果工作量巨大；3.开发周期长：引诱剂开发的每一步都需要占据较长的时间。

如果能找到棉铃虫识别气味的气味受体蛋白，那么将克服传统开发引诱剂过程中存在的缺陷。

发明内容

本申请之一提供了如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列在识别气味化合物中的应用。

在一个具体实施方式中，所述气味化合物为反-2-己烯醇、肉桂醛、苯乙酸甲酯、4-乙基苯乙酮、反-3-己烯醇和正辛醇中的至少一种。

本申请之二提供了能够编码如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的核苷酸序列在识别气味化合物中的应用。

在一个具体实施方式中，所述气味化合物为反-2-己烯醇、肉桂醛、苯乙酸甲酯、4-乙基苯乙酮、反-3-己烯醇和正辛醇中的至少一种。

在一个具体实施方式中，所述核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

本申请之三提供了一种鉴别气味化合物的方法，其包括如下步骤：

1)将第一氨基酸序列和第二氨基酸序列在细胞或昆虫的触角中进行共表达，得到表达有气味受体二聚体的细胞或昆虫的触角；其中，第一氨基酸序列包括如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列，第二氨基酸序列包括如SEQ ID No.11所示的氨基酸序列；

2)通过测定所述细胞或昆虫的触角在用气味化合物缓冲液刺激前后的细胞膜电位或神经元放电频率变化来判断所述气味化合物是否能够激活所述气味受体二聚体。

在一个具体实施方式中，在步骤1)中，所述细胞为非洲爪蟾的卵母细胞。

在一个具体实施方式中，在步骤1)中具体包括向非洲爪蟾的卵中导入第一核苷酸序列和第二核苷酸序列，之后培养所述非洲爪蟾的卵(例如培养2至5天)，得到表达有气味受体二聚体的非洲爪蟾卵母细胞；其中，所述第一核苷酸序列包括依次从5’到3’的第一核苷酸非编码序列，编码SEQ ID No.2所示的氨基酸序列的核苷酸序列和第二核苷酸非编码序列；第二核苷酸序列包括依次从5’到3’的第三核苷酸非编码序列，编码SEQ ID No.11所示的氨基酸序列的核苷酸序列和第四核苷酸非编码序列。