[发明专利]貉犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗及其制备方法和用途

权利要求书

1.貉犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗，其特征在于其有效成分包括貉细小病毒弱毒疫苗株HB-F69以及犬瘟热病毒弱毒疫苗株CDV3-CL，其中所述的貉细小病毒弱毒疫苗株HB-F69保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNO.14339。

2.如权利要求1所述的貉犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗，其特征在于疫苗成品中犬瘟热病毒滴度TCID₅₀≥10^4.0/头份，貉细小病毒滴度TCID₅₀≥10^5.5/头份。

3.一种制备权利要求1所述的貉犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将所述的貉细小病毒弱毒株HB-F69接种在猫肾细胞F81或CRFK上进行病毒扩增培养，每日观察细胞病变情况，待细胞病变达到80％时即可通过反复冻融的方法收获病毒液，并进行病毒滴度、纯净性检验，将检验合格的病毒液保存于-20℃；

(2)犬瘟热病毒弱毒疫苗株CDV3-CL接种于非洲绿猴肾细胞Vero上进行病毒扩增培养，每日观察细胞病变情况，待细胞病变达到80％时通过反复冻融的方法收获病毒液，并进行病毒滴度、纯粹性检验，将检验合格的病毒液保存于-20℃；

(3)将步骤(1)和(2)收获的病毒液混合均匀，加入冻干保护剂，定量分装于无菌的安瓶内，加盖置于冻干机内预冻、干燥，即得。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于疫苗成品中犬瘟热病毒滴度TCID₅₀≥10^4.0/头份，貉细小病毒滴度TCID₅₀≥10^5.5/头份。

5.权利要求1或2所述的貉犬瘟热-细小病毒性肠炎二联活疫苗在制备预防貉犬瘟热和细小病毒性肠炎药物中的应用。