[发明专利]一种脂氧合酶基因修饰间充质干细胞的获取方法及其应用

说明书

本发明公开了一种脂氧合酶基因修饰间充质干细胞的获取方法，先通过将多能诱导性干细胞放入诱导培养基中进行诱导，诱导周期为10‑20天，形成诱导性间充质干细胞；再从构建好的慢病毒中转染脂氧合酶基因来修饰诱导性间充质干细胞，得到脂氧合酶基因修饰的间充质干细胞。本发明还提供了通过上述方法获得的脂氧合酶基因修饰间充质干细胞作为抗炎药物的应用，通过该方法获取的脂氧合酶基因修饰间充质干细胞不仅具有早期靶向定位功能，而且具有双重抗炎效用。

技术领域

本发明涉及一种脂氧合酶基因修饰间充质干细胞的获取方法及其应用，属于生物工程技术领域。

背景技术

目前，对于一些重症胰腺炎(SAP)病人，其易发生全身炎症反应综合症（SIRS），而SIRS 极易引发远处器官损伤，导致多脏器功能障碍综合征（MODS），此问题是SAP 治疗的最后障碍。为改善上述病症，国内外相关报告指出可通过脂氧素类药品进行配合治疗，但由于现有的脂氧素类药品均是体外合成，价格昂贵，且进入体内后作用周期短，易失效，从而限制了其临床应用，存在改善空间。同时，国内外相关报告指出间充质干细胞（MesenchymalStem Cells，MSCs）具有炎症趋向性的特性，因此若能获得脂氧合酶基因修饰的间充质干细胞，则不仅具有早期靶向定位功能，而且具有双重抗炎效用，然而现有技术尚未发现将脂氧合酶基因修饰的间充质干细胞作为抗炎药物的应用以及有效获取脂氧合酶基因修饰的间充质干细胞的方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种脂氧合酶基因修饰间充质干细胞的获取方法及其应用，通过该方法获取的脂氧合酶基因修饰间充质干细胞不仅具有早期靶向定位功能，而且具有双重抗炎效用。

为实现上述目的，本发明提供了一种脂氧合酶基因修饰间充质干细胞的获取方法，先通过将多能诱导性干细胞放入诱导培养基中进行诱导，诱导周期为10-20天，形成诱导性间充质干细胞；再从构建好的慢病毒中转染脂氧合酶基因来修饰诱导性间充质干细胞，得到脂氧合酶基因修饰的间充质干细胞。

本发明可进一步设置为所述的脂氧合酶为5-脂氧合酶和15-脂氧合酶中的一种或两种混合。

本发明还提供了通过上述方法获得的脂氧合酶基因修饰间充质干细胞作为抗炎药物的应用。

本发明的有益效果是：通过采用上述方法，可简单安全的获得脂氧合酶基因修饰间充质干细胞，而将获得的脂氧合酶基因修饰间充质干细胞作为抗炎药物应用时，其不仅具有早期靶向定位功能，而且具有双重抗炎效用。

附图说明

图1为诱导前iPS的形态图；

图2为诱导后iMSCs的形态图；

图3为iMSCs的成骨实验分化图；

图4为iMSCs的成脂实验分化图；

图5为iMSCs流式鉴定图表；

图6为荧光镜下5-LO的表达图；

图7为普通光镜下5-LO的表达图；

图8为荧光镜下15-LO的表达图；

图9为普通光镜下15-LO的表达图；

图10为通过PCR鉴定5-LO和15-LO过表达水平的图表；

图11为通过Elisia检测所得图表。

具体实施方式

本发明提供了一种脂氧合酶基因修饰间充质干细胞的获取方法及其应用：