[发明专利]修饰的单结构域抗原结合分子及其应用

说明书

本发明涉及修饰的单结构域抗原结合分子，例如，SDAB分子，特别是结合TNFa的SDAB分子。本发明还公开了制备本发明所述的修饰的单结构域抗原结合分子的方法和使用本发明所述的修饰的单结构域抗原结合分子治疗例如TNFa‑相关病症的方法。

本申请要求于2010年7月16日提交的美国临时申请号61/365,307的优先权，该优先权申请的内容通过引用结合于此。

本申请是国际申请号PCT/IB2011/053007，国际申请日2011年7月6日，进入中国国家阶段日期为2013年3月18日，中国国家申请号为201180044867.1，发明名称为“修饰的单结构域抗原结合分子及其应用”的分案申请。

背景

肿瘤坏死因子α(TNFα)是一种主要由巨噬细胞和单核细胞产生的分泌的和膜结合的促炎性细胞因子。TNFa的合成在各种慢性自身免疫炎性疾病中被上调，所述慢性自身免疫炎性疾病如类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis)、溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis)、局限性肠炎(Crohn′s Disease)及其他。TNFα表达为三聚体跨膜蛋白，其可以被TNFα转化酶(TACE)蛋白水解切割，从而释放其可溶形式。两种形式的TNFα均与TNF受体(TNFR)1和TNFR2相互作用。

概述

本发明涉及修饰的单结构域抗原结合分子(single domain antigenbindingmolecules，在本文中还称为“SDAB分子”)。所述修饰的SDAB分子可以包含一个或多个与一种或多种靶标相互作用(例如，与之结合)的单抗原结合结构域。在一个实施方案中，所述修饰的SDAB分子的一个或多个单抗原结合结构域与肿瘤坏死因子α(TNFα)结合。所述SDAB分子可以被修饰，从而增加其体内生物特性。例如，所述SDAB分子可以被修饰，从而与未修饰的SDAB分子相比改善下述中的一种或多种：增加的半衰期；减少的免疫原性；或改善至少一种药动学/药效学(PK/PD)参数。在一个实施方案中，所述修饰的SDAB分子包含一种或多种聚合物分子，诸如聚(乙二醇)(PEG)或其衍生物。所述修饰的SDAB分子是有用的，例如，用于施用给受试者，例如人。本发明还公开了制备所述修饰的SDAB分子的方法，和使用所述修饰的SDAB分子治疗或预防例如TNFα-相关病症的方法。

因此，在一个方面中，本发明描述一种修饰的SDAB分子，所述分子包括：(i)与一种或多种靶标(例如，TNFα)相互作用(例如，与之结合)的一个或多个单抗原结合结构域；(ii)连接体(例如，非肽连接体和/或肽连接体)；和(iii)一个或多个聚合物分子，诸如聚(乙二醇)(PEG)或其衍生物。在一个实施方案中，所述SDAB分子的连接体是非肽连接体。在某些实施方案中，可以通过与第二结构部分(例如，聚合物分子)缔合，例如，共价或非共价缔合，而修饰所述SDAB分子。例如，所述SDAB分子可以共价连接适当的药用聚合物，诸如聚(乙二醇)(PEG)或其衍生物(诸如甲氧基聚(乙二醇)或mPEG)。

在一个实施方案中，所述修饰的SDAB分子包括一个或多个单结合结构域。例如，所述SDAB分子可以包括这样的多肽(例如，单链多肽)或由这样的多肽(例如，单链多肽)组成，所述多肽包含至少一个免疫球蛋白可变结构域(包括一个、两个或三个互补决定区(CDRs))。SDAB分子的实例包括天然缺乏轻链的分子(例如，VHH、纳米抗体或骆驼科动物来源的抗体)。所述SDAB分子可以来源于骆驼科动物或从骆驼科动物获得，所述骆驼科动物诸如骆驼(camel)、美洲驼(llama)、单峰骆驼(dromedary)、羊驼(alpaca)和栗色羊驼(guanaco)。在其他实施方案中，所述SDAB分子可以包括一种或多种单结构域分子，其包括但不限于，其他天然存在的单结构域分子(例如，鲨鱼单结构域多肽(IgNAR))和单结构域构架(例如，纤连蛋白构架)。