[发明专利]一种免疫球蛋白IgG检测试剂盒及其制备、使用方法在审

专利信息
申请号: 201711440998.7 申请日: 2017-12-27
公开(公告)号: CN108120839A 公开(公告)日: 2018-06-05
发明(设计)人: 甘宜梧;胡晓飞;邵丹;罗维晓;李静;王慧娟 申请(专利权)人: 山东博科生物产业有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68
代理公司: 济南泉城专利商标事务所 37218 代理人: 李桂存
地址: 250200 山东省济南市*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 免疫球蛋白IgG 检测试剂 试剂盒 体外检测试剂 缓冲体系 稳定性能 增强试剂 比浊法 大缺陷 血清 抗体 血浆 制备 检测
【说明书】:

发明涉及临床体外检测试剂技术领域,特别涉及一种稳定的免疫球蛋白IgG检测试剂盒,其用于对血清或血浆中的免疫球蛋白IgG含量的检测;免疫比浊法IgG检测试剂盒在试剂稳定性能上存在很大缺陷,本发明提供一种稳定的IgG检测试剂盒通过更换缓冲体系,使抗体在此环境中更加稳定,从而增强试剂的稳定性。

技术领域

本发明涉及临床体外检测试剂技术领域,特别涉及一种免疫球蛋白IgG检测试剂盒及其制备、使用方法,其用于对血清或血浆中的免疫球蛋白IgG含量的检测。

背景技术

人体血清免疫球蛋白的主要成分是IgG,它占总的免疫球蛋白的70-75%,人体血清免疫球蛋白IgG是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体,它仅以单体形式存在。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗体属于IgG,它在抗感染中起到主力军作用,它能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用(调理作用),中和细菌毒素的毒性(中和毒素)和病毒抗原结合使病毒失去感染宿主细胞的能力(中和病毒)。它是唯一能通过胎盘的Ig,在自然被动免疫中起重要作用。此外,IgG 还具有调理吞噬和结合SPA等作用。

现有技术中通用的免疫球蛋白IgG检测诊断方法是免疫比浊法。该方法使用的缓冲体系是Tris-HCl。Tris-HCl缓冲液的优点是:①因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;②对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

Tris-HCl缓冲液的缺点是:温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,即:△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,并在配置和使用温度下保存。这点体现在免疫球蛋白IgG检测试剂盒中就是,室温下配制的Tris-HCl缓冲液试剂盒在0℃~4℃下保存3个月以内可用,检测结果稳定性很好,但放置3个月后会发现试剂浑浊有沉淀,检测结果稳定性不好,不能再使用,需要重新配置,造成资源浪费。同时R2试剂盒中的抗体也易在温度降低时或长时间放置后出现沉淀。

因此,提供一种能够对温度变化不敏感的稳定的免疫球蛋白IgG检测试剂盒,是现有技术中亟需解决的问题。

PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline),一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/LMgCl2,以提供双价阳离子。PBS缓冲液(pH7.2-7.4)的组分为:NaCl 137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L, KH2PO4 2mmol/L。

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、吐温-20,加水。PBS 1L的配方为:磷酸二氢钾0.27g,磷酸氢二钠1.42g,氯化钠8g,氯化钾0.2g,加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。

不仅伪狂犬病毒要用PBS稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东博科生物产业有限公司,未经山东博科生物产业有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201711440998.7/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top