[发明专利]一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条

权利要求书

1.一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条，其特征在于，是在硝酸纤维素膜上分别喷涂羊抗鼠二抗和兔IgG抗体，分别作为检测线和质控线，两线之间相距0.4-0.8cm，干燥后，贴上吸水纸和样品垫，以0.3-2cm左右的宽度切条。

2.根据权利要求1所述的一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条，其特征在于，羊抗鼠二抗的浓度为0.5-2mg/mL，喷涂量为1-3μL/cm。

3.根据权利要求1或2所述的一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条，其特征在于，兔IgG抗体的浓度为0.5-2mg/mL，喷涂量为1-3μL/cm。

4.根据权利要求1所述的一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条，其特征在于，所述吸水纸、硝酸纤维素膜以及样品垫依次相邻，且相邻部位部分重叠区域的长度为1～5mm；所述吸水纸与硝酸纤维素膜重叠的部分位于硝酸纤维素膜的上侧。

5.根据权利要求1～4任一所述的一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条，其特征在于，还包括包覆所述试纸条的外壳；所述外壳包括底座和卡壳，所述卡壳上有观察口和加样口，以露出试纸条的局部区域；所述加样口开口于所述样品垫上部，以露出部分或全部所述样品垫区域；所述观察口开口于所述硝酸纤维素膜上侧，以露出全部所述检测带和所述质控带。

6.权利要求1～4任一所述的一种基于荧光微球标记的微囊藻毒素免疫定量试纸条在微囊藻毒素检测方面的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述方法是将Eu-荧光微球标记的微囊藻毒素人工抗原(Eu-MC-LR-BSA)和羊抗兔二抗(Eu-Goat-anti-Rabbit)作为荧光探针，将待测样品、Eu-MC-LR-BSA、微囊藻毒素单抗腹水和Eu-Goat-anti-Rabbit滴加到96孔板中，室温振荡一段时间，取混合物缓慢滴入试纸条的样品垫上，混合物会在毛细管作用下向吸水纸方向移动，当移动至T线时，荧光探针与抗体形成的抗原-抗体复合物会与包被在NC膜上的羊抗鼠二抗发生特异性反应而被捕获，多余的荧光探针继续向前移动，最终被包被在C线的兔IgG抗体捕获；若样品中不含微囊藻毒素，则大量的荧光探针-抗体复合物会被T线上的羊抗鼠二抗捕获，所以紫外光照射下，T线会出现明显的条带，反之，如果样品中含有微囊藻毒素，则样品会与荧光探针竞争结合游离抗体，样品中微囊藻毒素含量越高，则结合到T线的荧光探针-抗体复合物越少，条带越浅，直至消失。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，将30-50μL的待测样品、30-50μL Eu-MC-LR-BSA、30-50μL微囊藻毒素单抗腹水和5-20μL Eu-Goat-anti-Rabbit滴加到96孔板中，室温振荡8～10分钟，取混合物50～70μL缓慢滴入试纸条样品垫，35～37℃层析5～6min，然后通过HG-98免疫定量分析仪记录T值和C值，用T/T0作为参数，对样品进行定量检测。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述单抗腹水、荧光探针以稀释液的形式使用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，微囊藻毒素的单抗腹水稀释倍数为30000倍；两种荧光探针的稀释倍数为100倍。