[发明专利]治疗白癜风的产品及其使用方法和应用

权利要求书

1.一种治疗白癜风的产品，其特征在于，包括人脐带间充质干细胞来源的外分泌体以及人自体移植皮肤细胞。

2.根据权利要求1所述的治疗白癜风的产品，其特征在于，人脐带间充质干细胞来源的外分泌体的制备方法包括以下步骤：

采集新生儿脐带来源的间充质干细胞样本；

将新生儿脐带来源的间充质干细胞培养和传代；

通过超速离心法分离脐带间充质干细胞来源的外分泌体。

3.根据权利要求2所述的治疗白癜风的产品，其特征在于，所述新生儿脐带来源的间充质干细胞样本为新生儿10-15厘米无针孔的脐带；所述新生儿脐带来源的间充质干细胞是通过将脐带动静脉之间的华通氏胶剪碎后进行组织块贴壁培养所得；所述脐带间充质干细胞来源的外分泌体是待第3代-第6代新生儿脐带来源的间充质干细胞融合率达到80％时，更换无血清培养基连续培养24h，进行三次收集上清和离心步骤后，弃上清液，收集底部沉淀，用PBS重悬后，再次离心，弃上清，用PBS重悬，滤膜过滤除菌得到。

4.根据权利要求1所述的治疗白癜风的产品，其特征在于，人自体移植皮肤细胞的制备方法包括以下步骤：

选取皮肤，分离表皮和真皮，并弃去真皮；

从表皮中弃去黑素细胞和角质形成细胞即得。

5.根据权利要求4所述的治疗白癜风的产品，其特征在于，皮肤选自臀部或腹部，厚度为180-220um；将表皮剪碎，连同胰酶抑制剂转移到离心管中，涡旋，离心，弃上清，将细胞团用5ml DMEM-F12重悬，再次离心后用培养基重悬细胞即得。

6.根据权利要求1所述的治疗白癜风的产品的使用方法，其特征在于，选自如下的任意一种：

(1)将人脐带间充质干细胞来源的外分泌体在人自体皮肤细胞移植的同时进行受损局部皮下注射；

(2)将人脐带间充质干细胞来源的外分泌体与人自体皮肤细胞混合后喷洒覆盖在受损皮肤区域，以及

(3)将人脐带间充质干细胞来源的外分泌体单独反复涂抹于受损皮肤处。

7.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于，在受损区外周取3-5个点进行皮下定点注射所述人脐带间充质干细胞来源的外分泌体，每个点注射人脐带间充质干细胞来源的外分泌体180-220ul，然后以胶原膜覆盖和纱布敷料包扎固定，所述人脐带间充质干细胞来源的外分泌体用生理盐水稀释成为蛋白浓度为18-22ug/ul的悬浮液。

8.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，将人脐带间充质干细胞来源的外分泌体480-520ul与人自体移植皮肤细胞按照1：1-2体积比混合后，喷洒浸润在受损皮肤区域，然后以胶原膜覆盖和纱布敷料包扎固定，其中，每平方厘米的受损皮肤区域需要喷洒3-12×104个的人自体移植皮肤细胞。

9.根据权利要求7所述的使用方法，其特征在于，将人脐带间充质干细胞来源的外分泌体反复单独涂抹于受损皮肤处，每周涂抹一次，每次480-520ul，然后以胶原膜覆盖和纱布敷料包扎固定。

10.权利要求1所述的治疗白癜风的产品在免疫调节和复色中的应用。