[发明专利]一种白花蛇舌草组培工艺

说明书

本发明公开了一种白花蛇舌草组培工艺，包括：外植体的选择与消毒步骤、播种步骤、继代培养步骤、生根培养步骤、炼苗步骤和驯化移栽步骤。该组培工艺用经鉴定为正品的白花蛇舌草种植留种的种子进行组织培养，得到纯净的种苗后移栽在无白花蛇舌草伪品种子锯末基质上种植，可以得到正品白花蛇舌草和纯净种子，将获取的纯净种子进行人工种植，即得到正品白花蛇舌草。

技术领域

本发明涉及白花蛇舌草组织培养育苗技术领域，尤其涉及一种白花蛇舌草组培工艺。

背景技术

白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd)为茜草科一年生披散草本，高15-50cm，根细长，分枝，白花。茎略带方形或扁圆柱形，光滑无毛，从基部发出多分枝，花期春季，种子细小黄棕色；一年可收两季，春种8月收，秋种11月收。生长在海拔800米的地区，多生长在水田、田埂和湿润的旷地。主要分布在国内的福建、广东、香港、广西、海南、安徽、云南等地区；其味苦、淡，性寒，主要功效是清热解毒、消肿散结、利尿除湿，毒蛇咬伤等症，近年来发现白花蛇舌草对癌症和肝炎有较好的作用，临床用量较大。

但是，白花蛇舌草多为野生，家种很少，野生白花蛇舌草伪品较多，有水线草、纤花耳草、漆姑草、蚤缀、粟米草，伪品在新鲜时可通过细小的植株特征辨别，但干品和种子很难区分真伪。

而传统的白花蛇草育种方法是将白花蛇舌草种子直接播种到大田，这样的播种存在以下问题：

(1)种子质地较轻，播撒不均匀，较密的地方会影响长势；

(2)大田杂草多，混有伪品品种容易掺进白花蛇舌药材或种子；

(3)大田受温度，干湿度的影响，萌发率和成活率偏低，生长速度慢；

(4)和组织培养相比，没有种苗增殖阶段。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种白花蛇舌草组培工艺，用经鉴定为正品的白花蛇舌草种植留种的种子进行组织培养，得到纯净的种苗后移栽在无白花蛇舌草伪品种子锯末基质上种植，可以得到正品白花蛇舌草和纯净种子，将获取的纯净种子进行人工种植，即得到正品白花蛇舌草。

本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

一种白花蛇舌草组培工艺，包括：

外植体的选择与消毒步骤：取晒干去掉种壳的白花蛇舌草种子，进行消毒，得到无菌种子；

播种步骤：将所述无菌种子播种到第一1/2MS培养基中，消毒瓶盖后封好盖子，然后转到培养室中培养，种子萌发后，继续培养至种苗长2-3cm，获取一级母瓶；

继代培养步骤：将所述一级母瓶转到第二1/2MS培养基中，种苗长至5-6cm时，获取二级母瓶；

生根培养步骤：所述二级母瓶继续在所述第二1/2MS培养基中生长65-75天后，转到MS培养基中培养20-45天，获取生根瓶苗；

炼苗步骤：所述生根瓶苗在培养室中继续培养后，移到室外环境，接着用多菌灵稀释液浸泡根部，得到移栽苗；

驯化移栽步骤：将所述移栽苗移栽到基质中进行驯化，即成。

进一步地，在所述外植体的选择与消毒步骤中：选择生长4-5个月的白花蛇舌草植株，在7月下旬至8月上旬，整株采摘靠植株根部的种子，切除顶端不成熟部分，将种子成熟部分的茎杆一起晒干后，碾压出种子，去掉蜡质种壳，筛除杂质和灰份，然后放到洁净烧杯并移至接种室，在无菌操作台上进行消毒。

进一步地，在所述外植体的选择与消毒步骤中：进行消毒时，用75％的医用酒精浸泡30-60s，浸泡期间用镊子不断搅拌，接着用无菌水冲洗3-4次；最后用浓度为45-50％的次氯酸钠消毒6-8min，无菌水冲洗4-5次，得到无菌种子。