[发明专利]Glypican-3特异性抗体及其特异性CAR-T细胞

权利要求书

1.一种抗人GPC-3单克隆抗体，其特征在于，所述抗体具有：

(i)氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示的重链可变区；和

(ii)氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示的轻链可变区；

并且所述抗体与人GPC-3蛋白的N末端的前55-200个氨基酸区域结合。

2.一种单链抗体，其特征在于，所述的单链抗体具有：

(i)氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示的重链可变区；和

(ii)氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示的轻链可变区；

并且所述抗体与人GPC-3蛋白的N末端的前55-200个氨基酸区域结合。

3.如权利要求2所述的单链抗体，其特征在于，所述的单链抗体还包含VH和VL之间的接头。

4.如权利要求2所述的单链抗体，其特征在于，所述的单链抗体具有SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列。

5.一种嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述的CAR包含权利要求2所述的单链抗体。

6.如权利要求5所述的CAR，其特征在于，所述的CAR从N末端至C末端包括：

(i)权利要求2所述的单链抗体，

(ii)跨膜结构域，

(iii)至少一种共刺激结构域，和

(iv)激活域。

7.如权利要求5所述的CAR，其特征在于，所述的CAR具有下式I结构：

L-scFv-H-TM-C-CD3ζ (I)

式中，

各“-”独立地为连接肽或肽键；

L为任选的信号肽序列；

scFv为权利要求2所述的单链抗体；

H为任选的铰链区；

TM为跨膜结构域；

C为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列。

8.一种重组蛋白，其特征在于，所述的重组蛋白具有：

(i)如权利要求1所述的抗体、或权利要求2所述的单链抗体；以及

(ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。

9.一种抗体药物偶联物，其特征在于，所述的抗体药物偶联物含有：

(a)如权利要求1所述的抗体、或权利要求2所述的单链抗体；以及

(b)与所述抗体部分偶联的偶联部分，所述偶联部分选自下组：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、酶、或其组合。

10.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的抗体、权利要求2的单链抗体、权利要求5的嵌合抗原受体(CAR)。

11.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求10所述的核酸分子。

12.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求11所述的载体、染色体中整合有外源的权利要求10所述的核酸分子、或表达权利要求1所述的抗体、表达权利要求2所述的单链抗体、或表达权利要求5所述的CAR。

13.如权利要求12所述的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞为工程化的免疫细胞。

14.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求1所述的抗体、权利要求2的单链抗体、权利要求5的嵌合抗原受体(CAR)、权利要求9所述的抗体药物偶联物、或权利要求12所述的宿主细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

15.一种权利要求1所述的抗体、权利要求3的单链抗体、权利要求5的嵌合抗原受体(CAR)、权利要求9所述的抗体药物偶联物、或权利要求12所述的宿主细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗癌症或肿瘤的药物或制剂。