[发明专利]一种重唇石斛的组织培养育苗方法

说明书

本发明公开了一种重唇石斛的组织培养育苗方法，包括：外植体选择步骤、果荚消毒步骤、播种步骤、继代培养步骤、生根培养步骤、炼苗驯化步骤和移栽步骤。该重唇石斛的组织培养育苗方法能够有效的提高重唇石斛种苗的繁育速度及繁育数量，从母本源头控制种质的稳定性，保证种苗质量，实现重唇石斛优质种子种苗的工厂化生产，满足生产需求，缓解资源稀缺的现况。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种重唇石斛的组织培养育苗方法。

背景技术

重唇石斛(Dendrobium hercoglossum Rchb.f.)为兰科，主要分布在中国、泰国、老挝、越南、马来西亚。茎下垂，圆柱形或有时从基部上方逐渐变粗，具多节；总状花序通常数个，从落了叶的老茎上发出，常具2-3朵花，花开展；萼片和花瓣淡粉红色，唇瓣白色，分前后唇，前唇粉红色，较小，三角形，先端急尖，无毛；后唇半球形，前端密生短流苏，内面密生短毛，花期5-6月。

目前国内市场上的重唇石斛主要靠野生采挖，也有少数是人工栽培的。

但是，现有的重唇石斛人工栽培方法存在以下缺陷：一般通过分株繁殖和扦插的方式进行繁殖，繁殖种苗较少，繁殖率低，生长周期较长，正常生长环境下不经人工授粉结果的几率较小；由于果荚少，果粉细小，在自然环境下不易萌发生长等诸多因素的制约，野生的重唇石斛资源不断减少。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种重唇石斛的组织培养育苗方法，能够有效的提高重唇石斛种苗的繁育速度及繁育数量，从母本源头控制种质的稳定性，保证种苗质量，实现重唇石斛优质种子种苗的工厂化生产，满足生产需求，缓解资源稀缺的现况。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

一种重唇石斛的组织培养育苗方法，包括：

外植体选择步骤：在重唇石斛母本植株的开花期进行人工授粉，长出果荚后，继续培育，采摘成熟果荚并置于冰箱中保存，得到备用果荚；

果荚消毒步骤：取所述备用果荚，将种壳表面清洗干净，得到第一洁净果荚；将所述第一洁净果荚移至接种室中，进行酒精消毒和无菌水冲洗，得到第二洁净果荚；将所述第二洁净果荚用次氯酸钠消毒和无菌水冲洗，得到第三洁净果荚；将所述第三洁净果荚用升汞消毒和无菌水冲洗，得到第四洁净果荚；

播种步骤：解剖所述第四洁净果荚，将果粉撒到1/2MS培养基上，转移至培养室中培养，得到萌芽种子；

继代培养步骤：将所述萌芽种子置于培养室中继续培养，直至种苗长到2-3cm，获取一级瓶苗；将所述一级瓶苗转移至1/2MS培养基中，生长至5-6cm时，获取二级瓶苗；

生根培养步骤：将所述二级瓶苗转移至生根培养基中进行培养，获取生根瓶苗；

炼苗驯化步骤：将所述生根瓶苗置于培养室中培养，然后移到室外环境中进行驯化，获取驯化苗；

移栽步骤：将所述生根培养基的瓶盖打开，继续放置所述驯化苗3-5天，然后倒出，并用多菌灵浸泡苗根部，接着洗净阴干，移栽至基质中进行驯化。

进一步地，在所述外植体选择步骤中，重唇石斛母本植株的植株年龄为2-4年；长出果荚后继续培育3-4个月；将所述成熟果荚置于3-7℃的冰箱中保存1.5-2.5周。