[发明专利]一种三七花药愈伤组织的诱导方法

权利要求书

1.一种三七花药愈伤组织的诱导方法，其特征在于包括：

消毒灭菌步骤：取三七的花蕾，依次用酒精和氯化汞溶液浸泡消毒灭菌后，用无菌水冲洗；然后取花药接种于诱导培养基；

所述诱导培养基为以MS培养基作为基础，加入2,4-D、激动素、蔗糖和琼脂后得到的培养基；2,4-D在诱导培养基中的浓度为0.5-1.2mg/L，激动素在诱导培养基中的浓度为0.25-0.6mg/L，蔗糖在诱导培养基中的浓度为50-70g/L，诱导培养基的pH为5.4-5.8；

诱导培养步骤：在光照度1500-2000LX，温度21-25℃的条件下，进行愈伤组织诱导60-100d；

增殖培养步骤：将经诱导培养的愈伤组织切块后转接入增殖培养基中，光照度1500-2000LX，温度21-25℃的条件下，进行增殖培养20-60d，得到经增殖的愈伤组织。

2.如权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，消毒灭菌步骤中，用体积百分比为75％的酒精浸泡30s。

3.如权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，消毒灭菌步骤中，用质量百分比为0.1％的氯化汞溶液浸泡10min。

4.如权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，诱导培养步骤中，在光照度1600LX，光照时间12h/d，温度22℃的条件下，进行愈伤组织诱导。

5.如权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，增殖培养步骤中，光照度1800LX，光照时间12h/d，温度24℃的条件下，进行增殖培养。

6.如权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，2,4-D在诱导培养基中的浓度为1mg/L，激动素在诱导培养基中的浓度为0.5mg/L，蔗糖在诱导培养基中的浓度为60g/L，诱导培养基的pH为5.6。

7.如权利要求1所述的诱导方法，其特征在于，所述增殖培养基为以MS培养基作为基础，加入2,4-D、激动素、蔗糖和琼脂后得到的培养基；2,4-D在增殖培养基中的浓度为0.7-1.8mg/L，激动素在增殖培养基中的浓度为0.25-0.6mg/L，增殖培养基的pH为5.4-5.8。

8.如权利要求7所述的诱导方法，其特征在于，2,4-D在增殖培养基中的浓度为1.5mg/L，激动素在增殖培养基中的浓度为0.5mg/L，蔗糖在增殖培养基中的浓度为30g/L，增殖培养基的pH为5.6。

9.如权利要求1或7所述的诱导方法，其特征在于，所述MS培养基包括按重量份计的以下成分：

大量元素：硝酸钾1640-1660份；硝酸铵1890-1910份；硫酸镁360-380份；磷酸二氢钾160-180份；

微量元素：碘化钾8-9份；硼酸60-63份；硫酸锰223-230份；硫酸锌85-88份；钼酸钠2.4-2.6份；硫酸铜0.24-0.26份；氯化钴0.24-0.26份；

氯化钙：330-350份；

EDTA-Fe：63-67份；

有机组分：肌醇98-102份；烟酸0.45-0.55份；盐酸吡哆醇0.45-0.55份；维生素B10.095-0.105份；甘氨酸1.9-2.1份。