[发明专利]一种仙茅多糖及其制备方法和应用有效
申请号: | 201711451223.X | 申请日: | 2017-12-27 |
公开(公告)号: | CN107892725B | 公开(公告)日: | 2020-02-21 |
发明(设计)人: | 严春艳;王雪倩 | 申请(专利权)人: | 广东药科大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P19/10;A61P19/08;A61P29/00;A23L33/125 |
代理公司: | 广州科沃园专利代理有限公司 44416 | 代理人: | 孙文卉 |
地址: | 510006 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 仙茅 多糖 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种仙茅多糖,其特征在于,包括仙茅精多糖COP-1,所述仙茅精多糖COP-1的结构为:
其中m+n=10。
2.一种仙茅多糖,其特征在于,包括仙茅精多糖COP-2,所述仙茅精多糖COP-2的结构为:
其中n(v+w+x+y+z+m+19)=314。
3.一种仙茅多糖,其特征在于,包括仙茅精多糖COP-3,所述仙茅精多糖COP-3的结构为:
其中n+1.3m=22,或
其中n+1.3m=22。
4.一种仙茅多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、切段:将干燥的仙茅药材洗净,切成3~5mm的小段,得切段仙茅;
S2、浸泡:将S1所得切段仙茅放入容器中,加入水没过切段仙茅浸泡过夜,过滤,得仙茅原料;
S3、水提:将S2所得仙茅原料用热水进行提取,过滤,收集粗水提液,晾干药渣,其中提取时的加水量为药材质量的5~15倍,热水的温度为50~100℃,提取次数为1~5次;
S4、分级醇沉:将S3所得粗水提液进行减压浓缩、真空抽滤,得精水提液,向精水提液中加入乙醇至乙醇体积百分数为a%,静置后得沉淀Co1,将静置后的上清液进行减压浓缩,加入乙醇至乙醇体积百分数为b%,静置后得沉淀Co2,再将静置后的上清液进行减压浓缩,再次加入乙醇至乙醇体积百分数为c%,静置后得沉淀Co3,所述a、b、c的取值范围为10<a<60,60<b<80,80<c<100;
S5、碱提醇沉:将S3所得药渣用0.1~1mol/L的NaOH溶液进行提取,所加NaOH溶液的体积为药材体积的8~12倍,得碱提液,将碱提液用0.1~1mol/L的HCl溶液进行中和,然后依次进行抽滤和减压浓缩,最后加入乙醇至乙醇百分数为d%,所述d的取值范围为30<d<100,静置后得沉淀CoB;
S6、初步纯化:将S4、S5所得沉淀Co1、Co2、Co3和CoB分别进行复溶、脱蛋白、透析、冷冻干燥,即得仙茅粗多糖CO1、CO2、CO3和COB;
S7、将S6所得仙茅粗多糖CO2依次经离子交换柱层析分离、水或NaCl溶液洗脱、利用苯酚-硫酸法检测多糖含量并绘制洗脱曲线等步骤后根据洗脱曲线收集主峰,浓缩,透析,冷冻干燥,得初步纯化的仙茅粗多糖CO2;将初步纯化的仙茅粗多糖CO2用蒸馏水溶解,离心,将离心所得上清液用凝胶分子筛柱层析进一步纯化,用水进行洗脱,同样使用苯酚-硫酸法再次检测多糖含量并绘制洗脱曲线,然后根据洗脱曲线收集多糖洗脱液,浓缩,冷冻干燥,即得仙茅精多糖COP-1和COP-2;
将S6所得仙茅粗多糖CO3依次经离子交换柱层析分离、水或NaCl溶液洗脱、利用苯酚-硫酸法检测多糖含量并绘制洗脱曲线等步骤后根据洗脱曲线收集主峰,浓缩,透析,冷冻干燥,得初步纯化的仙茅粗多糖CO3;将初步纯化的仙茅粗多糖CO3用蒸馏水溶解,离心,将离心所得上清液用凝胶分子筛柱层析进一步纯化,用水进行洗脱,同样使用苯酚-硫酸法再次检测多糖含量并绘制洗脱曲线,然后根据洗脱曲线收集多糖洗脱液,浓缩,冷冻干燥,即得仙茅精多糖COP-3。
5.如权利要求4所述的仙茅多糖的制备方法,其特征在于,步骤S4和步骤S5中所述醇沉静置时间为12~36h。
6.如权利要求4所述的仙茅多糖的制备方法,其特征在于,步骤S7所述离子交换柱为DEAE离子交换柱,分子筛凝胶层析柱为葡聚糖凝胶柱,所述NaCl溶液的浓度范围为0.05mol/L-0.15mol/L。
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