[发明专利]一种人参种子无菌培养方法

权利要求书

1.一种人参种子无菌培养方法，其特征在于：该培养方法其包括以下步骤：

S1、对培养系统的无菌储水罐、营养液配制罐、转移罐、培养罐的内部和其他管道内部进行高温灭菌处理；该培养系统包括无菌储水罐、营养液配制罐、转移罐、培养罐、蒸汽供应系统、无菌氧气供应系统、纯水供应系统；

所述无菌储水罐的进水口与纯水供应系统连通，无菌储水罐设置有蒸汽灭菌入口和加压口，该蒸汽灭菌入口与蒸汽供应系统连通，所述加压口与无菌氧气供应系统连通，所述无菌储水罐的底部设置有排出口，该排出口与排出总管路连通；

所述营养液配制罐为带外夹套和搅拌装置的营养液配制罐，该营养液配制罐的进水口与无菌储水罐的排出口之间通过无菌水供应管道连通，所述营养液配制罐的顶部设置有蒸汽灭菌入口，所述营养液配制罐的外夹套上设置有蒸汽加热入口、蒸汽加热出口、冷却水入口和冷却水出口，所述蒸汽加热入口、蒸汽灭菌入口均与蒸汽供应系统连通，所述冷却水入口和冷却水出口与冷却水供应系统连通，所述营养液配制罐的底部设置有出料口，该出料口连接营养液转移总管道的一端，该出料口还与排出总管路连通；

所述转移罐为带外夹套转移罐，该转移罐的进料口与营养液配制罐的出料口与营养液转移总管道连通，所述转移罐的蒸汽灭菌入口与蒸汽供应系统连通，所述转移罐的底部的出料口设置有曝气系统，该曝气系统与无菌氧气供应系统管道连通，该出料口连通出料转移管道的一端，该出料口还与排出总管连通，所述转移罐的外夹套上设置连通有对转移罐进行保温的恒温控制系统；

所述培养罐上为带外夹套的培养罐，该培养罐上的进料口与出料转移管道的另一端连通，培养罐上的进液口与营养液转移总管道连通，培养罐的蒸汽灭菌入口与蒸汽供应系统连通，所述培养罐的底部出料口设置有曝气系统，该曝气系统与无菌氧气供应系统管道连通，所述培养罐的出料口与排出总管连通，所述培养罐的外夹套与恒温控制系统连通；

S2、无菌水从储水罐中加入到营养液配制罐中，并将培养液加入到营养液配制罐中进行搅拌混合形成营养液；

S3、对营养液配制罐内的营养液进行加热灭菌1-1.5h，灭菌温度为100-120℃；

S4、对营养液配制罐内进行降温处理，使营养液的温度降至30-40℃；

S5、将营养液从营养液配制罐送入转移罐中；

S6、在无菌的操作环境下将人参种子放入到转移罐中，在27.5-28.5℃的温度范围内培养5-10天，培养期内持续通入氧气曝气，曝气压力为0.15-0.35Mpa；

S7、将转移罐中内的培养液和人参种子一起转移到培养罐中进行培养，在27.5-28.5℃的温度范围内培养65-80天，转移罐内持续通入氧气曝气，曝气压力为0.15-0.35Mpa；

S8、将培养罐内的培养液排出后取出发芽后的人参幼苗。

2.如权利要求1所述的一种人参种子无菌培养方法，其特征在于：无菌储水罐、转移罐和培养罐的内部的高温灭菌方法均为蒸汽灭菌，蒸汽从无菌储水罐、转移罐、培养罐的顶部通入，从转移罐和培养罐的底部排出灭菌；营养液配制罐的灭菌方法为：先在营养液配制罐的外夹套通入蒸汽加热，同时营养液配制罐的底部通入无菌氧气并从顶部排出，然后关闭顶部排气，从顶部通入蒸汽并将营养液配制罐内的气体置换从底部排出。

3.如权利要求2所述的一种人参种子无菌培养方法，其特征在于：所述对营养液配制罐内的营养液进行加热灭菌的方式为：将蒸汽通入营养液配制罐的外夹套内，当营养液配制罐内的温度达到100℃时，将蒸汽通入到营养液配制罐内，当罐内温度达到120℃时，停止通入蒸汽并保持，当罐内温度达到100℃时再通入蒸汽，如此在100℃-120℃-100℃循环1.5h。

4.如权利要求3所述的一种人参种子无菌培养方法，其特征在于：所述步骤S6中，在无菌的操作环境下将人参种子放入到转移罐中的方式为：利用一个带操作口的的工作台罩扣在转移罐的上端，转移罐的上端设置有放入口，工作台内设置利用紫外灯灭菌12个小时以上，然后操作者双手酒精消毒，对盛装人参种子的器皿的外口消毒，操作者将盛装了人参种子的器皿从操作口放入工作台内进行紫外线杀菌最少20min，然后将人参种子倒入转移罐内。