[发明专利]一种高效、低毒禽类疫苗专用食品级白油的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种高效、低毒禽类疫苗专用食品级白油的制备方法，通过选用1号食品添加剂白油，向其中针对性添加起到关键免疫刺激效果的C16‑C20饱和烷烃组分，制得高效、低毒禽类疫苗专用食品级白油，可明显的缩短免疫空白期，免疫抗体水平持续增强，在不改变白油粘度的情况下安全性大大提高，动物免疫部位无红肿，溃烂等炎症反应，机体的刺激性较小。可有效提高白油作为疫苗佐剂的生物活性和提高疫苗免疫水平，增强动物抗病能力。

技术领域

本发明属于石油化工领域和生物化工领域，涉及一种高效、低毒禽类疫苗专用食品级白油的制备方法及应用。

背景技术

近年来提高禽类产品质量的呼声越来越高，做无公害的肉质产品，不仅仅是无动物性疫病、农药、兽药残留，更需要在动物免疫时期，对矿物油的控制上着手，减少矿油对动物体的炎症刺激，促进矿油的吸收和代谢，使被免疫的动物体内极少出现矿油残留。

目前国内疫苗佐剂存在着诸多安全性问题，油佐剂疫苗在动物免疫后会造成局部或全身性的临床反应，如组织发炎，肿胀，溃烂，影响禽类体体重增长和产蛋量，甚至造成动物伤残，这些对白油佐剂的安全性提出了更高的要求。在保证动物免疫安全性的同时，提高佐剂的免疫效力，是亟需解决的技术问题。

食品级白油是能够应用在食品脱模和食品机械润滑的矿物白油，和食品偶尔接触或不和食品接触，对是食品品质不造成破坏，无食品安全威胁。所以在动物疫苗领域里，推广使用食品级矿油作为疫苗佐剂，具有保证我国家禽产业和肉质产品健康的重要作用。

食品级白油是经过高度精炼，深度加氢除去硫、氮等杂质，重金属总量小于10ppm，无芳烃和对于碳数小于15以下的碳链严格控制的精炼矿物油。食品级白油控制C15以下的碳链烃类含量不得高于5％，而目前市面上的运动粘度低于6mm2/s的注射用白矿油，碳素分布无法符合食品级的要求，在其中重金属含量也无法得到保证。Wilner-等是使用了9种正构烷烃和11种异构烷烃在动物体上进行了毒性和疫苗效价的试验(VACCINE POTENTIATIONBY EMULSIFICATION WITH PURE HYDROCARBON COMPOUNDS.[J].Journal of Immunology,1963,91(91):210.)，结果显示C14以下的轻烷烃这产生了炎症反应，即对动物体的刺激性较为明显，显示为低毒性。而C16以上的烷烃表现出较好的佐剂活性，能够持续刺激机体产生抗原，在C24以上的烷烃，毒性反应基本很小，但是佐剂活性很低，在疫苗佐剂中起不到具有刺激性的佐剂的作用。目前市场上的白油类疫苗佐剂主要存在的问题是，低粘度的白油有毒性较大的风险，刺激性强，毒副反应较强，会引起注射部位红肿化脓的现象；高粘度的白油刺激性略小，但是会造成注射用困难，矿油肌肉残留较多，注射部位的肉芽肿和油包明显，矿油不被吸收和代谢。

这就要求我们在食品级白油的基础上，控制注射用白油的碳素含量，以达到良好的刺激机体产生抗原，持续性较好，同时不对机体产生炎症刺激的目的。在注射后，一个疫苗免疫周期内，白油的残留量较低或不产生残留，不造成肉质食品安全威胁。

本发明是在食品级白油的基础上，寻找合适碳素的烷烃类白油，保证白矿油的无毒和食品安全性要求，同时添加新物质提高矿油C16-24之间的烷烃的含量，提高佐剂的免疫效果，增强免疫抗体水平持续性，使得该白油佐剂制备的疫苗效价高，免疫刺激性小，安全性好。

有文献表明，白油烷烃的碳链长度较短，由其制备的疫苗吸收性较差，副反应严重，主要原理是较短的碳链或破坏细胞膜脂质双分子层，从而造成明显的红肿，油包，等刺激反应(陈红秀,魏延宏,朱秀同.不同油佐剂制备的禽流感疫苗对肉鸡安全性和免疫效力研究[C]//中国兽药大会.2014)。

鸡免疫后的7天和14天基本为肉鸡母源性抗体衰减阶段，免疫21天、28天为疫苗发挥效力的阶段。本发明克服普通白油佐剂，免疫空白期长，初期依赖母体抗原的阶段的劣势，对关键期关键免疫刺激的烷烃成分进行补强，增强免疫水平，提高免疫效价。