[发明专利]一种捕获白细胞的微流体装置及其制造方法

权利要求书

1.一种捕获白细胞的微流体装置，其特征包括样品信道(1)和支撑主体(4)，样品信道(1)是整体呈螺旋形的聚乙烯圆管，样品信道(1)一端设辨识信道入口(2)，样品信道(1)另一端设辨识信道出口(3)，样品信道(1)外侧与支撑主体(4)固定连接，样品信道(1)内壁上沉积有若干岛型微纳米金结构，所述的岛型微纳米金结构经过生物溶液的生物功能化修饰反应；所述的生物溶液为浓度0.1-50uM的可辨识白细胞表面抗原的抗体、适体或短胜肽溶液。

2.如权利要求1所述的一种捕获白细胞的微流体装置，其特征是所述的生物溶液为浓度0.1-50uM的Anti-CD45抗体溶液于新鲜PBS或浓度0.1-50uM的适体溶液于新鲜PBS。

3.如权利要求1所述的一种捕获白细胞的微流体装置的制造方法，其特征是该方法包括以下步骤：

一、微流体通道的制作

取一聚乙烯圆管围成螺旋管，作为样品信道,样品信道一端为辨识信道入口，另一端为辨识信道出口，构成微流体通道，样品信道外侧与支撑主体固定连接；

二、纳米金岛的生成

1)以去离子水于室温下清洗管道，室温干燥1h，

2)先以1-20mM的HAuCl₄去离子水溶液于室温下浸润管道5-20min，

3)再以1-20mM的NaBH₄去离子水溶液于室温下浸润管道5-20min，并以40-100rpm摇匀，

4)接着以1-20mM的HAuCl₄去离子水溶液与1-20mM的氨水的体积比为1:1的混和溶液浸润管道，于室温下反应20-120min并以60-100rpm摇晃，使管道内沉积出岛型微纳米金结构，即纳米金岛，反应后使用去离子水于室温下充分洗涤；

三、纳米金岛的生物功能化修饰

1)以300uL的新鲜PBS 0.1-2.0mL/hr流速于室温下润洗管道内的岛型微纳米金结构,

2)新鲜制备生物溶液待用，即浓度为0.1-50uM的可辨识白细胞表面抗原的抗体、适体或短胜肽溶液，

3)将制备的生物溶液注于具有岛型微纳米金结构的管道中，于室温下停留时间30-120min，进行生物功能化修饰反应,

4)反应完后，以新鲜PBS于室温下清洗生物功能化修饰反应后的具有岛型微纳米金结构的管道2次，即得到捕获白细胞的微流体装置。

4.如权利要求3所述的一种捕获白细胞的微流体装置的制造方法，其特征是所述的步骤三2)新鲜制备生物溶液中的生物溶液为浓度0.1-50uM的Anti-CD45抗体溶液于新鲜PBS或浓度0.1-50uM的适体溶液于新鲜PBS。

5.如权利要求1或2所述的一种捕获白细胞的微流体装置的使用方法，其特征是将待纯化样品从辨识信道入口注入样品信道中，经由正压或者负压的方式将样品流经本样品信道，流速为0.1-5mL/hr，在辨识信道出口处，将纯化后的细胞溶液以微量离心管收集，或直接连接到少量细胞纯化系统，进行进一步的微量细胞捕捉。