[发明专利]一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液及其制备方法和应用，包括基础培养液、胎牛血清、谷氨酰胺、丙酮酸钠、胰岛素、抗生素、表皮细胞生长因子和4‑羟乙基哌嗪乙磺酸。本发明配方成分明确，可以实现原代小鼠小肠上皮细胞快速扩增，该配方方法简单，细胞生长形态好，配方成分中含有抗生素，细胞增殖速度快，活力旺盛，配方的制备工艺简单，应用效果良好，细胞存活率较传统细胞培养液显著提高，且长期保存不易失效。

技术领域

本发明涉及生物技术及医学研究领域，具体为一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液及其制备方法和应用。

背景技术

在生物和医学研究领域，由于小鼠较其他实验动物喂养成本相对低，传代快及其他各项特点，经常会使用小鼠进行实验。由于小肠上皮细胞是位于小肠表层的细胞，具有分泌，排泄，保护和吸收等作用，是肠道最重要也是最主要的功能之一，因此经常利用小肠上皮细胞进行肠道功能、损伤或疾病的研究。由于小肠上皮细胞对培养条件要求较高，传统的培养液不能满足小鼠小肠上皮细胞的培养要求，往往造成小鼠小肠细胞成活率不高，细胞生长形态、功能不好，难以稳定传代。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液及其制备方法和应用。

本发明的目的之一在于，提供一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液，包括基础培养液、胎牛血清、谷氨酰胺、丙酮酸钠、胰岛素、抗生素、表皮细胞生长因子和4-羟乙基哌嗪乙磺酸。

进一步地，所述抗生素包括青霉素和链霉素。

进一步地，所述基础培养液为DMEM基础培养液。

进一步地，所述DMEM基础培养液中含有胎牛血清10％，L-谷氨酰胺4mM，丙酮酸钠1mM，胰岛素10ug/ml，青霉素50U/ml，链霉素50μg/ml，表皮细胞生长因子20ng/ml，4-羟乙基哌嗪乙磺酸10mM。

根据本发明的另一个目的，提供上述一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液的制备方法，包括混合所述配方比例的DMEM基础培养液、胎牛血清、谷氨酰胺、丙酮酸钠、胰岛素、抗生素、表皮细胞生长因子和4-羟乙基哌嗪乙磺酸。

进一步地，所述培养液的制备过程中，将上述各成分物质置于无菌容器中按比例均匀混合。

根据本发明的另一个目的，提供上述一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液的应用，应用于原代小鼠小肠上皮细胞培养。

本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：

本发明一种用于原代小鼠小肠上皮细胞培养的细胞培养液及其制备方法和应用，配方成分明确，可以实现原代小鼠小肠上皮细胞快速扩增，该配方方法简单，细胞生长形态好，配方成分中含有抗生素，细胞增殖速度快，活力旺盛，配方的制备工艺简单，应用效果良好，细胞存活率较传统细胞培养液显著提高。

具体实施方式

下面将结合本发明具体实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一种原代小鼠小肠上皮细胞培养液，包括DMEM基础培养液，DMEM基础培养液中含有胎牛血清10％，L-谷氨酰胺4mM，丙酮酸钠1mM，胰岛素10ug/ml，青霉素50U/ml，链霉素50μg/ml，表皮细胞生长因子20ng/ml，4-羟乙基哌嗪乙磺酸10mM。