[发明专利]一种葱属植物鳞茎组织培养方法

说明书

本发明公开一种葱属植物鳞茎组织培养方法，包括如下步骤：选取葱属植物地下鳞茎为外植体，消毒处理；将外植体接种于含有浓度为0.1‑0.5mg/L的2,4‑二氯苯氧乙酸、0.1‑1.0mg/L的噻苯隆和0.5‑1.5mg/L的维生素B₆的MS培养基中，依次进行热激处理、避光培养和光照培养；将外植体移植到含有浓度为0.1‑0.5mg/L的吲哚丁酸、0.1‑1.0mg/L的噻苯隆和8‑10mg/L的维生素B₁的White培养基中生根培养。本发明根据不同培育阶段的营养需要，使用不同的培养基，同时辅助相应的培育手段，协同作用，有效提高不定芽诱导效率和生根率，提高增殖率，增殖时间短，繁育速度快。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及到一种葱属植物鳞茎组织培养方法。

背景技术

葱属植物是我国的重要蔬菜和调味品，在日本、韩国及东南亚国家也应用较多。传统的繁殖方式多通过分球或种子繁殖，但种球或种子的产生需要3-4年，播种生产受季节或气候限制，繁殖数量有限，且葱属植物多为异花授粉作物，多代自交衰退严重，不能保证繁殖品质。另外，葱属植物的部分植株长期处于地下，易受病毒感染，一旦种球或种子感染病毒，无法根除，导致繁殖后代品质大幅度下降。

植物组织培养技术是在无菌条件下，将性状优良的植物的器官、组织、细胞等在人工配制的培养基上，给予适宜的条件进行培养，诱导产生不定芽和不定根，从而培育获得完整的植株。例如，中国专利文献CN105265316B公开的一种葱属植物鳞茎盘快速繁殖方法，该方法是将葱属植物中心部位清洗、消毒后，在中心部位距底端3-5mm处横切以去除上部鳞片，再沿主生长点垂直切线纵向分割成4份，去除主生长点及主生长点所在的鳞茎盘，利用剩余部分诱导丛生芽，并培养成苗。上述技术采用的是pH5.8，MS+6-BA 0.1-2.0mg/L、NAA0.05-1.0mg/L的培养基进行诱导培养，虽然在培养4周后鳞茎盘的最大增殖系数可达20，但该技术依然存诱导效率低，增殖率低的缺陷。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中利用植物组织培养技术培育葱属植物的诱导效率较低，增殖率低的缺陷，从而提供一种高效的葱属植物鳞茎组织培养方法。

为此，本发明提供了一种葱属植物鳞茎组织培养方法，包括如下步骤：

(1)选取葱属植物的地下鳞茎作为外植体，除去外部鳞茎后，进行消毒处理；

(2)将消毒处理后的所述外植体接种于含有浓度为0.1-0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸、浓度为0.1-1.0mg/L的噻苯隆和浓度为0.5-1.5mg/L的维生素B₆的MS培养基中，而后对所述外植体依次进行热激处理、避光培养和光照培养；

(3)将步骤(2)中得到的所述外植体移植到含有浓度为0.1-0.5mg/L的吲哚丁酸、浓度为0.1-1.0mg/L的噻苯隆和浓度为8-10mg/L的维生素B₁的White培养基中进行生根培养。

优选地，当不定根长至3-5cm时，移植到育苗基质中培养成苗。

所述的葱属植物鳞茎组织培养方法，所述步骤(1)中，所述消毒处理的方法为：将所述外植体用自来水冲洗10-20min后，用体积百分比浓度为70-75％的酒精冲洗10-20min，再浸泡于质量分数为0.1％的HgCl₂溶液中消毒8-12min后，取出后用无菌水冲洗4-6次，每次20-40s。

所述的葱属植物鳞茎组织培养方法，所述步骤(2)中所述MS培养基中含有质量分数为2-3％的蔗糖，所述MS培养基的pH值为5.8-6.5。

所述的葱属植物鳞茎组织培养方法，所述步骤(2)中所述热激处理的方法为，在30-40℃温度下避光培养3-5天。