[发明专利]一种含有低温脂肪酶基因的工程菌及其构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 201711457722.X 申请日: 2017-12-28
公开(公告)号: CN108192906B 公开(公告)日: 2021-05-11
发明(设计)人: 谢悦波;姚竣耀;刘才群 申请(专利权)人: 江苏世邦生物工程科技有限公司
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N1/21;C12N15/62;C07K19/00;C12N9/20;C12N11/02;C02F3/34;C12R1/19
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 王艳
地址: 211800 江苏省南京市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 含有 低温 脂肪酶 基因 工程 及其 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种生活污水处理方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)重组工程菌株BL21- pCAMBIA1301-sole-lip-948进行诱导表达获得菌液;

2)脂肪酶lip-948的纯化和固定化;

3)将固定化脂肪酶lip-948进行生活污水处理;

所述重组工程菌株BL21- pCAMBIA1301-sole-lip-948的构建方法如下:将融合基因sole-lip-948导入表达载体pCAMBIA1301中获得重组表达载体pCAMBIA1301- sole-lip-948;将重组表达载体pCAMBIA1301-sole-lip-948转化到大肠杆菌BL21中,挑取阳性克隆LB培养基中过夜培养得到重组工程菌株BL21- pCAMBIA1301 sole-lip-948;所述融合基因sole-lip-948的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;

所述脂肪酶lip-948的纯化和固定化步骤为:将步骤1)诱导后的菌液加入磷酸缓冲液,超声波处理,然后加入大豆卵磷脂和橄榄油混匀,再超声波处理,冰上放置然后超声波处理,冰上放置,然后离心收集上层油体即为固定化脂肪酶Lip-948,所述超声波的功率为30W、破碎时间为8s、间隔时间为8s,每次超声20个循环,所述污水处理环境温度为10℃,所述生活污水的pH为9.0。

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