[发明专利]一种红细胞祖细胞无血清培养基及其使用方法

权利要求书

1.一种红细胞祖细胞无血清培养基，其特征在于，由基础培养基以及其他添加成分组成；

所述基础培养基为Iscove's Modified Dulbecco's Medium；

所述红细胞祖细胞无血清培养基为ITS添加剂10ml、GlutaMAX 10ml、LipidConcentrate 1ml、L-抗坏血酸2-磷酸酯镁倍半镁盐水合物250μmol、硫酸亚铁3μmol、硝酸铁0.2μmol、硫辛酸1μmol、氢化可的松1μmol、干细胞因子SCF 100μg、促红细胞生成素EPO20μg和白细胞介素-3 5μg，使用基础培养基补足至一升。

2.一种如权利要求1所述的红细胞祖细胞无血清培养基在人红细胞祖细胞制备中的应用。

3.一种如权利要求1所述的红细胞祖细胞无血清培养基的使用方法，其特征在于，所述方法包括：

S1、收集血液样本；

S2、使用梯度离心方法将S1中收集的血液样本中不同的血液成分分离，获得单个核细胞；

S3、将S2中获得的单个核细胞在红细胞祖细胞无血清培养基中进行选择性扩增培养，获得含有CD71⁺/CD235a⁺特异性标志的红细胞祖细胞。

4.根据权利要求3所述的一种红细胞祖细胞无血清培养基的使用方法，其特征在于，所述血液样本在进行血液成分分离之前，在3℃至5℃冰上存储小于或等于48小时。

5.根据权利要求3或4所述的一种红细胞祖细胞无血清培养基的使用方法，其特征在于，所述S3步骤中，进行选择性扩增培养的持续时间为6至16天。

6.根据权利要求3或4或所述的一种红细胞祖细胞无血清培养基的使用方法，其特征在于，所述S3步骤中，含有CD71⁺/CD235a^+/-特异性标志的红细胞祖细胞占扩增培养后红细胞祖细胞总数的50～100％。