[发明专利]一种基于脂联素基因ADP鉴定鸭繁殖性状的分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一种基于脂联素基因ADP鉴定鸭繁殖性状的分子标记及其应用，所述脂联素基因ADP的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，所述分子标记为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的第430位的碱基由G突变为A。与现有技术相比，本发明利用调节脂肪代谢的脂联素基因多态产生的多种基因型与产蛋和种鸭繁殖的相关性，通过对脂联素基因的分子标记与繁殖性状的关联，提供了一种间接选择家禽繁殖性状的方法，建立了鸭繁殖性状早期选择的育种方法。由于该脂联素基因ADP同时表达于母禽卵巢和输卵管，以及公禽睾丸，因此还可以对公禽进行选择，填补了常规鸭繁殖性状选择过程中无法对公禽进行选择的空白。

技术领域

本发明涉及的是分子标记的技术领域，尤其涉及的是一种基于脂联素基因ADP鉴定鸭繁殖性状的分子标记及其应用。

背景技术

繁殖性状是畜禽生产中重要的经济性状之一，并受脂肪沉积的影响。母禽在育成期和产蛋期体脂沉积过多，卵巢和输卵管受大量脂肪包围和压迫，影响卵泡发育和排卵，导致产蛋下降。而分泌蛋壳的子宫腺周围脂肪沉积增加则影响蛋壳的形成，降低禽蛋品质。家禽脂肪沉积的遗传力为0.3-0.85，呈中高度遗传。然而，常规选择的遗传进展缓慢，且无法对公禽进行选择。

脂联素是由脂肪细胞特异分泌的内源性细胞因子，对家禽繁殖性状发挥重要的调控作用，是调节卵泡发育和卵母细胞成熟过程中能量需求的关键信号。脂联素基因同时表达于母禽卵巢和输卵管，以及公禽睾丸。中枢表达的脂联素通过加强葡萄糖代谢促进能量消耗以降低体脂，起到促进排卵、提高繁殖力的作用。

地方鸭种繁殖性状因就巢性而受到严重影响，单纯常规选择的遗传改良效率不高，利用功能基因标记进行分子标记辅助选育可以从遗传上根本改良选择性状，从而加速遗传进展。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种基于脂联素基因ADP鉴定鸭繁殖性状的分子标记及其应用，以解决常规鸭繁殖性状遗传选择进展缓慢，且无法对公禽进行选择的技术问题。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种基于脂联素基因ADP鉴定鸭繁殖性状的分子标记，所述脂联素基因ADP的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，或为与SEQ ID NO.1所示序列互补的核苷酸序列，所述分子标记为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的第430位的碱基由G突变为A，或为如SEQ ID NO.1所示序列互补的核苷酸序列的第430位的碱基由C突变为T，该突变导致该位点编码的氨基酸由丙氨酸突变为苏氨酸。

本发明还提供了一种上述分子标记在鉴定鸭繁殖性状中的应用，所述鸭繁殖性状主要指鸭的产蛋数和孵化率。

本发明还提供了一种利用上述分子标记鉴定鸭繁殖性状的方法，包括以下步骤：

(1)提取鸭翅静脉血液总DNA；

(2)以所述分子标记所在位点上下游的脂联素基因ADP的DNA序列为模板，设计特异性扩增引物，再以步骤(1)的鸭翅静脉血液总DNA为PCR扩增模板，进行PCR扩增，获得PCR扩增产物；

(3)采用HgaⅠ酶切PCR扩增产物，获得酶切产物，由于HgaⅠ酶切识别位点为GACGC/CTGCG，因此，当该分子标记位点由G突变为A时，不能被HgaⅠ酶识别，电泳检测酶切产物，实现对鸭繁殖性状的遗传鉴定，具体为：

I、包含1条条带，则为AA纯合型，繁殖性状最优；

Ⅱ、包含2条条带，则为GG纯合型，繁殖性状最差；

Ⅲ、包含3条条带，则为AG杂合型，繁殖性状适中。

进一步地，所述分子标记所在位点的上游扩增产物的长度与下游扩增产物的长度均大于100bp，且所述分子标记所在位点的上游扩增产物与下游扩增产物的长度差大于100bp，以利于电泳检测和条带区分。