[发明专利]固定氨氧化细菌的玻璃板及其制备方法

权利要求书

1.一种固定氨氧化细菌的玻璃板，其特征在于，制备该固定氨氧化细菌的玻璃板方法的具体步骤如下：

(1)将长度、宽度和厚度分别为10cm、5cm和0.5cm的玻璃板加入到250mL质量百分比浓度为45％的NaOH溶液中，在1000r/min条件下搅拌5分钟，过滤除去液体，经800mL去离子水洗涤后在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质A1；将物质A1用200目的细砂纸打磨后得到物质A2；

(2)将8.19克酒石酸氢钾在1000r/min搅拌条件下加入到500mL去离子水中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，然后加入3.3克叔丁醇钾，摇匀后得到混合液K；

(3)将2.1克琼脂糖和1.4克邻苯二甲酸氢钾加入到混合液K中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液L；

(4)将物质A2加入到混合液L中，在温度为40℃的摇床中摇动30分钟，过滤除去液体得到物质A3，将物质A3在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质A；

(5)将1.2克2-氯-3-氰基吡嗪加入到750mL无水乙醇中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，摇匀后分成等量5份，得到混合液M1、混合液M2、混合液M3、混合液M4、混合液M5；

(6)将0.16克2-溴-5-硝基吡啶和0.22克4-溴四氢吡喃加入到250mL三氯甲烷中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，摇匀后分成等量5份，得到混合液N1、混合液N2、混合液N3、混合液N4、混合液N5；

(7)将混合液M1和0.28克四溴噻吩加入到混合液N1中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液O1；

(8)将物质A加入到混合液O1中，在温度为40℃的摇床中摇动30分钟，过滤除去液体得到物质A1，将物质A1在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质A2；

(9)将混合液M2和0.25克四溴噻吩加入到混合液N2中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液O2；

(10)将物质A2加入到混合液O2中，在温度为40℃的摇床中摇动30分钟，过滤除去液体得到物质A3，将物质A3在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质A4；

(11)将混合液M3和0.22克四溴噻吩加入到混合液N3中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液O3；

(12)将物质A4加入到混合液O3中，在温度为40℃的摇床中摇动30分钟，过滤除去液体得到物质A5，将物质A5在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质A6；

(13)将混合液M4和0.19克四溴噻吩加入到混合液N4中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液O4；

(14)将物质A6加入到混合液O4中，在温度为40℃的摇床中摇动30分钟，过滤除去液体得到物质A7，将物质A7在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质A8；

(15)将混合液M5和0.16克四溴噻吩加入到混合液N5中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液O5；

(16)将物质A8加入到混合液O5中，在温度为40℃的摇床中摇动30分钟，过滤除去液体得到物质A9，将物质A9在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质B；

(17)将1.22克四氢噻喃-4-酮在1000r/min搅拌条件下加入到1500mL无水乙醇中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，摇匀后分成等量5份，得到混合液P1、混合液P2、混合液P3、混合液P4、混合液P5；

(18)将1.8克1-氨基蒽醌加入到混合液P1中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液Q1；

(19)将物质B加入到混合液Q1中，在温度为38℃的摇床中摇动25分钟，过滤除去液体得到物质B1，将物质B1在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质B2；

(20)将2.1克1-氨基蒽醌加入到混合液P2中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液Q2；

(21)将物质B2加入到混合液Q2中，在温度为38℃的摇床中摇动25分钟，过滤除去液体得到物质B3，将物质B3在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质B4；

(22)将2.4克1-氨基蒽醌加入到混合液P3中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液Q3；

(23)将物质B4加入到混合液Q3中，在温度为38℃的摇床中摇动25分钟，过滤除去液体得到物质B5，将物质B5在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质B6；

(24)将2.7克1-氨基蒽醌加入到混合液P4中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液Q4；

(25)将物质B6加入到混合液Q4中，在温度为38℃的摇床中摇动25分钟，过滤除去液体得到物质B7，将物质B7在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质B8；

(26)将3.0克1-氨基蒽醌加入到混合液P5中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液Q5；

(27)将物质B8加入到混合液Q5中，在温度为38℃的摇床中摇动25分钟，过滤除去液体得到物质B9，将物质B9在温度为70℃的干燥箱中放置100分钟，得到物质C；

(28)将1.8克NH₄NO₃、10.2克NaCl、2.3克KH₂PO₄、0.5克FeCl₃、0.3克CoCl₂、0.2克ZnCl₂、3.3克MgSO₄、1.6克CaCl₂和0.1克NiCl₂加入到1000mL去离子水中，在1000r/min条件下搅拌5分钟，得到混合液R；

(29)将10mL含菌量为5×10¹²CFU/mL的氨氧化细菌培养液加入到混合液R中，在1000r/min条件下搅拌3分钟，得到混合液S；

(30)将物质C加入到混合液S中，在温度为35℃的摇床中摇动24小时，过滤除去液体得到物质D；

(31)将物质D在温度为25℃的培养箱中放置8小时，得到的物质即为固定氨氧化细菌的玻璃板。