[发明专利]一种基于分子生物学的黑腹螯蜂和稻虱红螯蜂的鉴别引物及方法

权利要求书

1.一种基于分子生物学的黑腹螯蜂和稻虱红螯蜂的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、提取待检测样本的基因组DNA作为PCR的模板；

步骤2、对待检测样本基因组DNA进行PCR扩增，得到PCR扩增产物并进行测序，PCR扩增的上游引物F和下游引物R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；

步骤3、将待检测样本PCR扩增产物的序列导入GENEDOC软件中去掉多余序列后，然后与检验序列Haplogonatopus atratus和检验序列Haplogonatopus japonicus比较，当待检测样本的序列与检验序列Haplogonatopus atratus的一致时，则该待检测样本为黑腹螯蜂；当待检测样本的序列与检验序列Haplogonatopus japonicus的一致时，则该待检测样本为稻虱红螯蜂；

其中，检验序列Haplogonatopus atratus和检验序列Haplogonatopus japonicus的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述待检测样本为螯蜂幼虫、茧或成虫。

3.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述PCR扩增体系如下：2.5μl Mg²⁺Free 的10×PCR Buffer、2μl浓度为2.5mmol/L的dNTPs、1.5μl浓度为25mmol/L的MgCl₂、浓度为10μmol/ L的上游引物F和下游引物R各1μl、待检测样本基因组DNA1μl、0.125μl的TaqDNA Polymerase，再加灭菌水补足25μl。

4.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于，所述PCR扩增程序为：94℃ 5 min；95℃ 30s、62℃ 20s、72℃ 1min，35个循环；72℃ 5 min。