[发明专利]与新铁炮百合光周期成花途径相关的基因及其应用有效
申请号: | 201711463739.6 | 申请日: | 2017-12-28 |
公开(公告)号: | CN108265066B | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
发明(设计)人: | 贾桂霞;赵玉倩;闫笑;汪莲娟;张倩;曹钦政 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/11;C12N15/82;C12N5/10;C12N1/21;A01H5/02;A01H6/20;C12R1/19 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;王璐 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新铁炮 百合 光周期 途径 相关 基因 及其 应用 | ||
1.与新铁炮百合光周期成花途径相关的基因,其特征在于,所述基因为LfCOL6,来自于新铁炮百合,所述LfCOL6的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.由权利要求1所述基因转录得到的RNA。
3.由权利要求1所述基因编码表达的蛋白质。
4.用于扩增权利要求1所述基因的引物。
5.含有权利要求1所述基因的载体。
6.根据权利要求5所述的载体,其特征在于,所述载体的构建方法包括如下步骤:
(1)提取新铁炮百合叶片基因组RNA,反转录得cDNA,以所述cDNA为模板,利用权利要求4所述的引物,经PCR扩增获得目的基因;
(2)将步骤(1)所得到的PCR产物,克隆至pLB载体,选取测序正确的菌株提取其质粒;
(3)以步骤(2)的质粒为模板,利用带有NcoⅠ酶切位点的上游引物和带有Bst EⅡ酶切位点的下游引物进行PCR扩增,得到带有粘性末端的扩增片段;
(4)用Bst EⅡ-HF和NcoI-HF对pCAMBIA1301进行双酶切,并回收酶切产物;
(5)采用In-Fusion酶将步骤(3)所得的带有粘性末端的扩增片段与步骤(4)所得的酶切产物进行连接;
(6)将步骤(5)所得的连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,进行抗性筛选,并挑去阳性菌斑进行测序验证,测序正确的菌株提取其质粒,即为含有目的基因为权利要求1所述基因的载体。
7.含有权利要求1所述基因的工程菌。
8.权利要求1所述的基因在促进新铁炮百合开花中的应用。
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