[发明专利]与新铁炮百合光周期成花途径相关的基因及其应用有效

专利信息
申请号: 201711463739.6 申请日: 2017-12-28
公开(公告)号: CN108265066B 公开(公告)日: 2020-12-01
发明(设计)人: 贾桂霞;赵玉倩;闫笑;汪莲娟;张倩;曹钦政 申请(专利权)人: 北京林业大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/11;C12N15/82;C12N5/10;C12N1/21;A01H5/02;A01H6/20;C12R1/19
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;王璐
地址: 100083 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 新铁炮 百合 光周期 途径 相关 基因 及其 应用
【权利要求书】:

1.与新铁炮百合光周期成花途径相关的基因,其特征在于,所述基因为LfCOL6,来自于新铁炮百合,所述LfCOL6的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.由权利要求1所述基因转录得到的RNA。

3.由权利要求1所述基因编码表达的蛋白质。

4.用于扩增权利要求1所述基因的引物。

5.含有权利要求1所述基因的载体。

6.根据权利要求5所述的载体,其特征在于,所述载体的构建方法包括如下步骤:

(1)提取新铁炮百合叶片基因组RNA,反转录得cDNA,以所述cDNA为模板,利用权利要求4所述的引物,经PCR扩增获得目的基因;

(2)将步骤(1)所得到的PCR产物,克隆至pLB载体,选取测序正确的菌株提取其质粒;

(3)以步骤(2)的质粒为模板,利用带有NcoⅠ酶切位点的上游引物和带有Bst EⅡ酶切位点的下游引物进行PCR扩增,得到带有粘性末端的扩增片段;

(4)用Bst EⅡ-HF和NcoI-HF对pCAMBIA1301进行双酶切,并回收酶切产物;

(5)采用In-Fusion酶将步骤(3)所得的带有粘性末端的扩增片段与步骤(4)所得的酶切产物进行连接;

(6)将步骤(5)所得的连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,进行抗性筛选,并挑去阳性菌斑进行测序验证,测序正确的菌株提取其质粒,即为含有目的基因为权利要求1所述基因的载体。

7.含有权利要求1所述基因的工程菌。

8.权利要求1所述的基因在促进新铁炮百合开花中的应用。

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